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Parasitosis regionales - Biblioteca central de la Universidad ...

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<strong>Parasitosis</strong> <strong>regionales</strong><br />

El naranja <strong>de</strong> acridina es un fluorocromo capaz <strong>de</strong> unirse a molécu<strong>la</strong>s <strong>de</strong> estructuras<br />

celu<strong>la</strong>res o subcelu<strong>la</strong>res, sin alterar su estructura, para producir <strong>la</strong> l<strong>la</strong>mada “Fluorescencia<br />

Secundaria” cuando se <strong>la</strong> excita con luz <strong>de</strong> longitud <strong>de</strong> onda a<strong>de</strong>cuada. Posee<br />

particu<strong>la</strong>r afinidad por los ácidos nucleicos, <strong>la</strong>s nucleoproteínas, los mucopolisacáridos,<br />

sulfomucinas, fibras elásticas, mucoproteínas, lisosomas, y usualmente tiene utilidad<br />

para el estudio <strong>de</strong> fenómenos neoplásicos, ya que <strong>la</strong>s imágenes fluorescentes obtenidas<br />

están en re<strong>la</strong>ción al contenido y distribución <strong>de</strong> ácidos nucleicos en <strong>la</strong>s célu<strong>la</strong>s, y esto,<br />

a su vez está ligado a los mecanismos <strong>de</strong> síntesis proteica (alteraciones en <strong>la</strong>s célu<strong>la</strong>s<br />

cancerosas), ya que <strong>la</strong> fluorescencia ver<strong>de</strong> o amaril<strong>la</strong> es característica <strong>de</strong> los núcleos<br />

celu<strong>la</strong>res y <strong>de</strong>l citop<strong>la</strong>sma <strong>de</strong> <strong>la</strong>s célu<strong>la</strong>s en necrosis. La aparición <strong>de</strong> fluorescencia<br />

roja o roja negruzca en el citop<strong>la</strong>sma pue<strong>de</strong> ser índice <strong>de</strong> elevada síntesis proteica o<br />

<strong>de</strong> <strong>la</strong> presencia <strong>de</strong> inclusiones con alto contenido en ARN.<br />

Sobre extendidos <strong>de</strong> flujo vaginal se pue<strong>de</strong>n, a<strong>de</strong>más, evi<strong>de</strong>nciar modificaciones<br />

celu<strong>la</strong>res asociadas al ciclo hormonal, incluso estados precancerosos.<br />

El complejo Naranja <strong>de</strong> Acridina-ADN, presenta fluorescencia ver<strong>de</strong> y ver<strong>de</strong> amarillenta<br />

(por ejemplo en los núcleos celu<strong>la</strong>res) mientras que el Naranja <strong>de</strong> Acridina-ARN da<br />

fluorescencia rojo anaranjado como son <strong>la</strong>s inclusiones citop<strong>la</strong>smáticas <strong>de</strong> ARN, Virus<br />

o C<strong>la</strong>mí<strong>de</strong>as.<br />

En T. vaginalis, el citop<strong>la</strong>sma aparece <strong>de</strong> color rojo <strong>la</strong>drillo (color <strong>de</strong> <strong>la</strong> solución madre<br />

<strong>de</strong> naranja <strong>de</strong> acridina) y el núcleo color amarillo verdoso, ova<strong>la</strong>do o a<strong>la</strong>rgado. La<br />

coloración <strong>de</strong>l f<strong>la</strong>ge<strong>la</strong>do es distintiva y permite una fácil diferenciación <strong>de</strong> otras estructuras,<br />

fundamentalmente célu<strong>la</strong>s epiteliales <strong>de</strong> <strong>de</strong>scamación vaginal, leucocitos<br />

o hematíes, aún con 10X.<br />

Las muestras pue<strong>de</strong>n permanecer a temperatura ambiente hasta 24 horas, sin reducción<br />

<strong>de</strong> <strong>la</strong> sensibilidad diagnóstica <strong>de</strong>l método, mientras que si están fijadas, mantienen<br />

<strong>la</strong> coloración y características morfológicas por cinco días.<br />

Estas dos coloraciones fueron realizadas antes <strong>de</strong> <strong>la</strong>s 48 horas <strong>de</strong> tomadas <strong>la</strong>s<br />

muestras. Parale<strong>la</strong>mente se efectuaron coloraciones con naranja <strong>de</strong> acridina sobre<br />

extendidos conservados en freezer a -20ºC.<br />

Para los tres métodos validados se <strong>de</strong>terminaron <strong>la</strong>s Sensibilida<strong>de</strong>s Diagnósticas y los<br />

Valores Predictivos <strong>de</strong> sus resultados Positivos y Negativos.<br />

Los resultados obtenidos fueron los siguientes:<br />

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