Parasitosis regionales - Biblioteca central de la Universidad ...

Parasitosis regionales
segmento específico del mismo. La reacción de PCR asegura una sensibilidad superior
a cualquier técnica parasitológica, ya que posibilita la detección de la infección, aun
habiendo sólo un 2 % del ADN de un único organismo, en una muestra sanguínea de
un paciente infectado. Son diversas las secuencias de ADN del parásito que han sido
elegidas para amplificarlas mediante este método. Un ADN muy repetitivo, el ADN
nuclear satelital, puede ser amplificado con mucha sensibilidad mediante los “primers”
Tcz1–Tcz2 que flanquean una secuencia de 195 bases (Moser DR y COL., 1989). Otros
«primers» muy utilizados en la detección de T. cruzi son los que flanquean una región
del ADN del kinetoplástido 121 y 122 ó S35 y S36 que amplifican una región de 330
bases (Sturm NR y col., 1989). Otras secuencias del T. cruzi han sido amplificadas con
fines diagnósticos, y resumidos en una revisión reciente (Guhl F y col., 2002), pero
la mejor sensibilidad y detección de todas las cepas del parásito fue lograda con la
amplificación de la secuencia del ADN satelital (Virreira M y col., 2003).
6. 2. Métodos Inmunoserológicos
La dectección de anticuerpos generados por la infección con T. cruzi puede efectuarse
por numerosos métodos inmunológicos. La utilidad de estos métodos y su aplicación
depende de las diferentes situaciones epidemiológicas y de los recursos humanos y
técnicos de los servicios de salud.
A partir de 1913 en que Guerreiro y Machado publicaron la reacción de fijación del
complemento, se han descripto una gran variedad de pruebas serológicas con diferente
sensibilidad, especificidad y nivel de reactividad. En la actualidad las técnicas
de elección en la mayoria de los laboratorios son la hemoaglutinación, la inmunofluorescencia
indirecta, las técnicas inmunoenzimáticas y las de aglutinación de partículas
de última generación.
Reacción de Hemoaglutinación Indirecta Cuantitativa (HAI): La prueba se hace en
policubetas con fondo en U, con diluciones seriadas con un factor de dos del suero del
paciente en presencia de hematíes de cordero o ave sensibilizados con antígenos del
parásito. La reactividad se visualiza como un manto de aglutinación del 50-100% en
el fondo del pocillo. Esta técnica tiene una sensibilidad de alrededor del 98 % y una
especificidad variable. Ha sido evaluado en varios centros referenciales con paneles
de gran número de sueros (Camargo y col., 1986).
Reacciones de aglutinación de partículas como latex o gelatina: Estos ensayos han
mostrado aceptables niveles de sensibilidad y especificidad con procedimientos simples
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