Parasitosis regionales - Biblioteca central de la Universidad ...

Sixto Raúl Costamagna y Elena C. Visciarelli (Compiladores)
se realiza la electroforesis en gel de poliacrilamida y la electrotransferencia de las
proteínas a una membrana de nitrocelulosa, PVDF o nylon. Posteriormente se bloquean
los sitios libres de la membrana y luego de exhaustivos lavados se incuba con
el suero problema. En el próximo paso se agrega un anticuerpo anti-inmunoglobulina
marcado con una enzima y posteriormente el sustrato/cromógeno que luego de reaccionar
dará lugar a productos que precipitan en el lugar de la reacción. Es una técnica
básicamente cualitativa y en la que se puede observar una o varias bandas según
existan anticuerpos específicos para uno o varios componentes del antígeno. Se utiliza
como diagnóstico confirmatorio de varias parasitosis por protozoarios y helmintos,
debido por lo general, a su alta especificidad y sensibilidad y se recomienda cuando
no hay que estudiar un gran número de sueros.
4.5-Radioallergosorbent Test (RAST): teniendo en cuenta que los antígenos
parasitarios actúan como alergenos y que en las helmintosis aparece la IgE específica
además del incremento de la IgE total se ha desarrollado el RAST para su detección.
Brevemente, la técnica consiste en poner en contacto el suero o fluidos del paciente
con matrices que contiene el Ag absorbido a su superficie; después del lavado esta
unión Ag-Ac es revelada por Acs anti-IgG o IgE humana marcados con radioisótopos.
La presencia y cantidad de radioactividad es proporcional a la cantidad de Ac presente
en el suero. Actualmente, y para estar a un mayor alcance de los laboratorios, también
se dispone de dicho test empleando Acs marcados con enzimas.
5- Técnicas de Inmunofluorescencia
Estas técnicas utilizan anticuerpos monoclonales o policlonales específicos marcados
con fluorocromos como el isotiocianato de fluoresceína o rodamina. Los antígenos
utilizados puden ser formes o particulados tales como trofozoítos, quistes, larvas,
cutículas parasitarias, etc. Si existe reacción positiva, los complejos Ag-Ac formados se
ponen de manifiesto mediante la observación en un microscopio de fluorescencia.
5.1-Inmunofluorescencia directa (IFD): en la IFD los anticuerpos utilizados
como reactivos están marcados con fluorocromos que se añaden sobre los parásitos
libres o cortes de tejidos infectados en los que se desea comprobar la existencia de
un determinado antígeno específico. Estas reacciones pueden desarrollarse en suspensión
o en improntas. Entre las parasitosis diagnosticadas por esta metodología
se encuentra la cryptosporidiosis.
5.2-Inmunofluorescencia indirecta (IFI): la IFI utiliza cortes de tejidos infectados
o suspensiones parasitarias para determinar la presencia de anticuerpos espe-
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