Télécharger le texte intégral - ISPED-Enseignement à distance

141
secondes pour formation d’un coagulum de couleur marron. Les tubes sont ensuite envoyés au
laboratoire de référence (CeDReS) dans une glacière contenant du Freeze-back.
Trois prélèvements sanguins sont réalisés à J30, J45 et J90 de vie dans des tubes gris de 2 ml
contenant du fluorure oxalate. En cas d’hyperlactatémie identifiée sur deux prélèvements consécutifs,
un quatrième prélèvement est réalisé à M6 ou M12 pour étudier l’évolution des hyperlactatémies
confirmées.
Les mesures des lactates ont été réalisées au CeDReS, au Centre Hospitalier Universitaire de
Treichville. La mesure de l’acide lactique se fait sur du sang déprotéinéisé compte tenu du délai entre
les prélèvements et le dosage. Le lactate est mesuré par un automate Roche COBAS INTEGRA 400.
Un contrôle de qualité interne est effectué lors de chaque dosage des lactates au CeDReS. Ce contrôle
est fourni par la société Roche : Precinorm U (PNU) et Precipath U (PPU) (Roche Diagnostics,
Mannheim, Germany). Un contrôle de qualité externe a été effectué avec la collaboration du Dr Anne
Vassaux de l’Hôpital Necker à Paris. Ce contrôle de qualité a été réalisé en pratique dans le laboratoire
de biochimie de l’Hôpital Corentin Celton (Issy les Moulineaux, France) dans le cadre du programme
d’assurance qualité des laboratoires d’analyses médicales (ASQUALAB).
• Autres examens biologiques
La mesure des CD4 a été réalisée à la préinclusion à la 32ème semaine d’aménorrhée pour les mères
issues de la cohorte 1.0 et à la 28 ème semaine d’aménorrhée pour les mères incluses dans la cohorte 1.1.
Les prélèvements ont été réalisés sur des tubes violets EDTA. La numération lymphocytaire et le
comptage des CD4 ont été effectués par la Cytométrie en flux (Becton Dickison).
Chez les enfants, le diagnostic précoce de l’infection à VIH repose sur au moins deux tests
virologiques positifs. Les prélèvements sont effectués à S4 de vie et un stockage pour la confirmation
à S6 de vie. Le stockage de J2 est utilisé seulement chez les enfants positifs pour déterminer avec plus
de précision le moment de l’acquisition de l’infection à VIH. Les prélèvements sont réalisés sur des
microtubes EDTA (Becton Dickinson). La charge virale est mesurée à S4 de vie par bDNA pour les
enfants de la cohorte 1.0 (37). Un enfant est considéré comme infecté si la charge virale plasmatique
(VIH RNA) est supérieure à 5000 copies/ml. Le seuil de détection est de 250 copies d’ARN VIH/ml
avec 0,2 ml de plasma utilisé. Pour les enfants de la cohorte 1.1, la mesure de la charge virale
plasmatique est faite par la PCR Taqman en temps réel. Le seuil de détection est de 300 copies/ml
(152, 153).