Doktorarbeit Endversion - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

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Durch die enormen Kosten der PCR-Untersuchung war es in der vorliegenden Arbeit
nur möglich stichprobenartig einige Fermenterproben aus zwei Läufen auf das
Vorhandensein von toxinbildenden Genen zu untersuchen. Aus diesen Untersuchungen
wurde deutlich, dass die Clostridien zunächst nicht nachgewiesen
werden konnten. Erst nach einigen Tagen der kontinuierlichen Zufuhr von
C. botulinum sind toxinbildende Gene nachweisbar. Dabei war auffällig, dass der
Einsatz einer Silage mit erniedrigtem Reineiweißanteil in Kombination mit
Clostridienzulagen bereits zwei Tage früher zu einem positiven Nachweis von toxinbildenden
Genen führte. Bei einer Zulage von C. perfringens in Kombination mit der
Kontrollsilage kam es nicht zu einem positiven Nachweis. Offensichtlich eliminierte
das Pansenmilieu die zugesetzten Clostridien. Dies funktionierte erfolgreich bis die
Anzahl der Clostridien das Vermögen des Pansens sie zu eliminieren überschritt.
Dieser Zeitpunkt kam im vorliegenden Versuch 3 (Schadsilage S-11) bis 5
(Kontrollsilage) Tage nach dem ersten Einsatz der Clostridien. Durch ein
Anreicherungsverfahren konnten bis Tag 17 weiterhin toxinbildende Gene
nachgewiesen werden. Anschließend erfolgte keine weiterere Untersuchung,
weshalb nicht ausgesagt werden kann, wie lang das System brauchte, um wieder
gegen die Clostridien angehen zu können.
Diese Ergebnisse legen nahe, dass nicht nur aus der Umwelt aufgenommenes Toxin
die Pansenpassage überstehen kann, wenn die Abbaukapazität des Pansens
überschritten ist (vergl. Kap. 2.3.1.3, KOZAKI u. NOTERMANS 1980), sondern auch
die Clostridien erst nach kontinuierlicher Zufuhr im Pansensaft nachweisbar sind.
Unklar bleibt, ob sie letztendlich die Magenpassage im Rind überleben können und
somit eine Ansiedlung im Darm möglich wäre oder sie lediglich nach längerer Zulage
die Vormagenfunktion beeinträchtigen, was sekundär zu massiven Allgemeinstörungen
führen kann. Um den Darm zu erreichen, müssten die Clostridien nach der
Pansenpassage noch den Labmagen passieren. Eine Möglichkeit würden die
Protozoen darstellen. Aus diesem Grund wurden Ausstriche der Fermenterproben
angefertigt, nach Gram gefärbt und lichtmikroskopisch beurteilt. Hierbei konnten
stäbchenförmige Bakterien in den Protozoen differenziert werden, die sich durch ihre
grampositive Färbung deutlich von den rosa gefärbten Protozoen abhoben. Das
beweist zwar, dass Protozoen die stäbchenförmigen Bakterien aufgenommen haben,
aber nicht ob es sich hierbei tatsächlich um Clostridien handelte. Auch ob die
Bakterien in den Protozoen verdaut werden oder überleben können, bleibt unklar. Es
konnten zudem nur wenige Protozoen auf diese Art und Weise beurteilt werden, da
entweder die extreme Füllung mit grampositiven Bakterien oder Stärke, die sich auch
stark anfärbte, eine Beurteilung unmöglich machte.
In Kapitel 2.2.3 wurde auf die Fähigkeit verschiedener Bakterien hingewiesen eine
Polysaccharidhülle zu bilden. Für Klebsiella aerogenes hing die Bildung dieser Hülle
mit dem Überleben der Protozoenpassage zusammen (COLEMAN 1975b).
Für einige Clostridienarten ist die Bildung einer Polysaccharidhülle ebenfalls beschrieben
(C. butyricum: BERGERE et al. 1975; C. perfringens Hobbs Typ A:
CHERNIAK u. FREDERICK 1977; C. pasteurianum: DARVILL et al. 1977; C. difficile:
BALDASSARRI et al. 1991). Gesetzt den Fall C. botulinum Typ C und