Doktorarbeit Endversion - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

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5.6.4 Auswirkungen auf die Protozoenvitalität
Die Verteilung der Farbstoffaufnahme schwankte während des Versuchs.
Tendenziell sank aber sowohl in den Läufen 5 und 6, als auch in den Läufen 7 und 8
die Hefeaufnahme zwischen Tag 10 und 11 und stieg erst ein bis zwei Tage nach
Absetzen der Silage wieder.
Aus diesen Ergebnissen lässt sich schließen, dass die Vitalität der Protozoen durch
die Umstellung von Heu auf Silage herabgesetzt war. Ob der Reineiweißanteil der
Silagen hierbei von Bedeutung war, bleibt weiterhin unklar, da die Ergebnisse von
Lauf 5 und 6 mit denen von Lauf 7 und 8 nicht übereinstimmten. In den Läufen 7 und
8 gab es keinen Unterschied zwischen der Hefeaufnahme durch die Protozoen bei
Zulage der verschiedenen Grassilagen, während die Aufnahme der Hefe in den
Läufen 5 und 6 bei Einsatz der Schadsilagen im Vergleich zu K-01 herabgesetzt war.
Die Clostridienzulage führte zu keiner Beeinflussung der Protozoenvitalität.
Die Studien von STÄNDER (2009, vergl. Kap. 2.4.1.4) ließen die Vermutung zu, dass
sich die Vitalität der Protozoen durch die Zugabe von Clostridien verringern müsste,
da diese vermutlich über die Zielstruktur des BoNT verfügen- die SNARE-Proteine.
Der Grund dafür, dass eine solche Veringerung der Vitalität durch die Clostridienzulage
im vorliegenden Versuch nicht beobachtet wurde, könnte sein, dass kein
BoNT durch die Clostridien im RuSiTec produziert wurde oder dass die produzierte
Menge nicht ausreichte, um einen sichtbaren Effekt auf die Protozoen zu haben.
Eine dritte Möglichkeit besteht darin, dass das BoNT die Protozoen in ihrer Vitalität
nicht einschränkte.
5.7 Ergebnisse aus der PCR
Die PCR-Untersuchungen sollten Erkenntnisse über den Verbleib der Clostridien im
Pansen liefern. Durch den geringen Umfang der PCR-Untersuchungen ergaben sich
lediglich Hinweise. Es fiel auf, dass bei Zulage von C. botulinum, 2 mL sowohl bei K-
01 als auch bei S-11 erst ab Tag 15 toxinbildende Gene nachgewiesen werden
konnten. Das könnte daran liegen, dass durch die permanente Aufnahme von
Clostridien, die panseneigenen Abwehrmechanismen derart gestört wurden, dass
eine Etablierung der Clostridien im Pansen möglich war. Eine weitere Möglichkeit
besteht darin, dass erst nach fünf Dosen die Nachweisgrenze in den 10 mL
Probenvolumen aus der Fermenterflüssigkeit erreicht wurde. Bei K-01 blieb es bei
dem positiven Nachweis an Tag 15. Bei Zulage von S-11 erfolgte ein zusätzlicher
Nachweis an Tag 17 nach Anreicherung der Proben. Nach Tag 17 erfolgte keine
Untersuchung mehr. Es scheint, als hätte die Schadgrassilage ein verlängertes
Überleben von C. botulinum begünstigt, während bei Einsatz der unauffälligen
Kontrollsilage das Pansenmilieu nach Absetzen der Clostridienzufuhr in der Lage war
das Fremdbakterium wieder zu verdrängen.