Doktorarbeit Endversion - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

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bad. Ein Deckel verhinderte das Absetzen von Kondenswasser aus dem Wasserbad
in den Röhrchen. Anschließend wurde eine Pansensaftprobe frisch aus dem
fistulierten Versuchstier entnommen und in jedes Röhrchen fünf mL geseihter
Pansensaft gefüllt. Drei der Ansätze wurden mit der entsprechenden Menge
vorgewärmten Farbstoffs versetzt und anschließend im Wasserbad für zwei Stunden
gelagert. Der vierte Ansatz lagerte vor der Zugabe des Farbstoffs zunächst vier Stunden
im Kühlschrank. Die Beurteilung erfolgte wie bei den anderen Ansätzen nach
zwei Stunden.
Nach der Lagerung der Proben wurden diese mit 28.000 xg fünf Min. bei RT
zentrifugiert und der Überstand verworfen. Der Bodensatz wurde in 0,4 mL 0,9 %iger
NaCl gelöst, 20 µL dieser Lösung auf einen Objektträger gegeben und mit einem
Deckgläschen abgedeckt. Um eine adäquate Menge an Protozoen zu erfassen,
wurden aus jeder Probe 100 Zellen gezählt und mit -, +, ++ oder +++ beurteilt. Um
einen tagesabhängigen Effekt auszuschließen, erfolgten Wiederholungen der
Versuche an drei weiteren Tagen.