Doktorarbeit Endversion - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

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5.2.2 Beurteilung der verwendeten Futtermittel
Die eingesetzten Silagen waren identisch mit denen aus den Dissertationen GAST
(2010), GRESNER (2011) und LUMPP (2011) und wurden daher bereits ausführlich
kritisch beurteilt.
Zu beachten ist die Lagerung der Silagen, die bei den vorangegangenen Versuchen
ein Jahr betrug (näheres s. GAST 2010) und zum Zeitpunkt der vorliegenden Untersuchungen
ein weiteres Jahr bei -18 °C fortgesetzt wurde. Hierbei waren die Lagerungsbedingungen
für alle Silagen gleich.
5.2.3 Beurteilung der eingesetzten Clostridien
Clostridium botulinum und C. perfringens wurden für die Versuche ausgewählt, da es
sich um ubiquitär vorkommende Keime handelt, die zu Erkrankungen in
Rinderbeständen führen können. Die Optimaltemperatur von Clostridien liegt
zwischen 37 °C und 45 °C liegt und auch ein pH-Wert zwischen 5,5 und 8,0 für das
Wachstum positiv ist (JAY et al. 2005), waren die Bedingungen im RuSiTec, was
diese Parameter betrifft, für das Überleben und die Vermehrung der Bakterien als gut
zu bewerten.
Bei der Auswahl der Toxintypen zur Inokulation im RuSiTec waren zwei Aspekte von
Bedeutung. Zum einen sollten es Toxintypen sein, die dafür bekannt sind Erkrankungen
beim Rind auszulösen und regelmäßig in der Umwelt angetroffen werden,
zum anderen musste eine Anzucht unter Laborbedingungen möglich sein, um zum
Zeitpunkt der Zulagephase in ausreichender Menge zur Verfügung zu stehen. Daher
wurden C. botulinum Typ C (CCUG 7970) und C. perfringens Typ B (CCUG 2035)
eingesetzt. Die Fähigkeit zur Spaltung von Proteinen und Peptiden ist von
besonderer Bedeutung in der vorliegenden Studie, da während der Versuche
Material in Form von Silagen in den RuSiTec eingebracht wurde, welches
unterschiedliche Anteile an freien Aminosäuren enthielt (s. Tab. 9.5), die schnell zum
Abbau zur Verfügung standen. Bestünde für die Clostridien keine Möglichkeit zur
Proteolyse, wären die freien Aminosäuren ein wichtiger Faktor für das Überleben und
Wachstum dieser Fremdbakterien. C. botulinum Typ C wurde in der Literatur als
generell nicht proteolytisch aktiv beschrieben (EKLUND u. POISKY 1972; BRENNER
et al. 1986). Jedoch bei einzelnen wenigen Stämmen entdeckten SKULBERG (1964)
sowie TJABERG (1973) proteolytische Aktivität, wobei sich toxinogene Stämme
immer als nicht zur Proteolyse fähig herausgestellt hatten. Verschiedene Medien
förderten die Expression der Proteasen (Magermilch-Agar eignete sich am besten,
mit Zusatz von Hefe gab es gleiche Ergebnisse, schlechter waren Proteose-Peptone-
Trypticase-Yeast-Extrakt-Glucose-Medium und Robertsons Fleischbrühe). Die
Expression von Proteasen war aber deutlich geringer als bei den Clostridien, die
andere Toxintypen bildeten (TJABERG 1973). TJABERG (1973) fand bei seinen