Doktorarbeit Endversion - Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover

3.2.2 Herkunft der Silagen
- 27 -
Zum Einsatz kamen eine Kontrollsilage (K-1) und zwei Schadsilagen (S-11 und
S-05). Die Analysenergebnisse der Silagen sind in Tab. 9.4 aufgeführt. Die Silagen
wurden im Institut für Lebensmittelqualität und –sicherheit der Stiftung Tierärztliche
Hochschule Hannover auf das Vorhandensein der Botulinumtoxingene A, B, C, D, E
und F mittels Anreicherungsverfahren untersucht und ausschließlich negativ getestet
(s. Tab. 9.3).
3.2.3 Herkunft der Clostridien
Die Clostridienkulturen wurden vom Institut für Lebensmittelqualität und –sicherheit
der Stiftung Tierärztliche Hochschule Hannover bereitgestellt. Die Kulturen wurden in
Medium (RCM 0149 der Firma Oxoid ® ) gelöst in die Fermenter eingebracht. Bei
C. botulinum handelte es sich um den Toxintyp C (CCUG 7970), bei C. perfringens
um den Toxintyp B (CCUG 2035). Zur proteolytischen Aktivität dieser beiden
Stämme lagen keine Angaben vor.
Zur Herstellung einer bestimmten Konzentration wurde die optische Dichte des
Mediums, in denen die Clostridien angezüchtet wurden, nach McFarland im Densimat
gemessen. Bei 0,4 OD betrug die Konzentration ca. 1,2 x 10 8 Bakt./mL. Es erfolgte
eine Verdünnung von 1:25, so dass eine Konzentration von ca. 3 x 10 9
Bakt./mL Bakteriensuspension erreicht wurde.
Zur Qualitätssicherung wurde von jeder Probe ein hitzefixierter Ausstrich nach Gram
gefärbt und unter 1000-facher Vergrößerung (PZO Warszawa, 27610) auf Reinheit
kontrolliert.
3.3 Spendertier
Angaben zur Fütterung und Haltung des Spendertiers, sowie der Entnahme des
Pansenmaterials sind in der Dissertation von GAST (2010) nachzulesen.
3.4 Versuchsdurchführung
Der gesamte Versuch bestand aus acht voneinander unabhängigen Durchgängen,
die im Folgenden Lauf 1-8 genannt werden. Der Versuchsablauf ist in der Dissertation
von GAST (2010) beschrieben.