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Técnico Superior Sanitario de Laboratorio de Diagnóstico Clínico
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3. Metanol al 70 %
4. Metanol al 95% con CLH 1N 5%
5. Metanol absoluto
. Una vez hecho esto se introducirán los portas en la estufa de 60º C durante 48 horas para su
envejecimiento.
- En general, salen bandas directamente, pero si a la hora de hacer l estudio al microscopio queremos
mejorar la calidad e la tinción, deberemos pasar la extensión de nuevo, por la batería de alcoholes.
- Importante: si hemos utilizado aceite de inmersión debemos eliminarlo antes de desteñir pasando los
portas por Xilol (2 baños de 5 minutos)-
- Terminado todo el proceso podremos pasar ya a la tinción como se ha indicado previamente, más o
menos tiempo, según se deseen destacar más las bandas claras o las oscuras.
- Las extensiones ya estarán listas para hacer os estudios al microscopio.
Bandas C (demostración de centrómeros y del cromosoma Y)
- Extensiones viejas 2-3 días a 60º C
- Tratar con CLH o, 2 N (se prepara en el día a partir de CLH 1 N: 0,2 ml de CLH 1 N + 0,8 ml de agua
destilada), durante 60 minutos con preparación invertida.
- Lavar en agua destilada dejando la preparación hacia arriba, en placa de petri.
- Tratar con hidróxido de bario a saturación (2,5 gr en 50 ml de agua destilada (preparado en el día y
filtrado, durante 5 minutos a 37º C
- Lavar en agua corriente (a chorro suave) y enjuagar en agua destilada
- Tratar con 2SSC durante una hora a 60-65ºC.
- Teñir con giemsa al 2% media hora.
Notas:
- 2SSC (NaCL 17,53 gr, Citrato Sódico 8,82 gr y agua destilada hasta 1000 ml)
- También se puede teñir con Wright, como habitualmente y obtendremos bandas C y G conjuntamente
- Cuanto más vieja sea la extensión, menor el tiempo de tratamiento con Bario.
5.2. SINCRONIZACIÓN CON METHOTREXATE
a) Extracción de sangre
- La extracciones se deberán hacer los lunes o martes, excepto en los casos de urgencia con riesgo de
fallecimiento
- Desinfectar la zona precordial o venosa con alcohol. NO utilizar ningún preparado que lleve yodo (el
yodo es un potente inhibidor del cultivo celular). Dejar secar