MAP Technical Reports Series No. 106 UNEP

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d'"eaux anormalement colorées" sont observés. L'absence de mortalité dans un délai
de 96 heures donne à penser qu'il n'existe pas de biotoxines hydrosolubles, alors
qu'une mortalité élevée suggère leur présence. Avec un taux de mortalité élevé, il
convient de prendre en considération le type de phytoplancton, et l'on commence les
recherches pour l'extraction ou l'isolement des biotoxines.
(c) Tests de toxicité aiguë sur des souris en recourant à des échantillons d'eau de
mer, de phytoplancton et à des extraits de moules
(i) Extraction directe des biotoxines de l'eau et du phytoplancton
Les biotoxines peuvent être hydrosolubles ou liposolubles. Les toxines hydrosolubles
peuvent être en solution ainsi que dans les cellules de phytoplancton, les toxines
liposolubles ne sont décelées que dans les cellules ou dans la matière particulaire. On
peut, dans un premier temps, obtanir la concentraiton du phytoplancton par filtration au
moyen de filtres Millipore ou par centrifugation. Dans le cas de toxines liposolubles
provenant de G. breve, l'extraction directe par éthyl-éther (McFaren et al., 1965;
Cummins et al., 1968) à partir de 2 à 16 litres d'eau de mer permet d'établir la
présence de biotoxines par évaporation de l'extrait à l'éther et l'injection intrapéritonéale
de la fraction lipidique chez des souris de 19-23 g (Cummins et al., 1968). Pour une
preuve plus générale de la toxicité chez des souris, il est possible de recourir soit à des
extraits par filtration soit aux résidus de centrifugation. Cependant, pour réaliser des
études plus détaillées sur la nature chimique de la toxine, il est nécessaire d'utiliser un
filet à plancton approprié afin d'en recueillir des quantités suffisantes et d'y appliquer
des techniques d'extraction des toxines hydrosolubles (AOAC, 1970) et liposolubles
(McFarren et al., 1965; Scheuer et al., 1967; Bagnis et al., 1974).
(ii) Concentration des biotoxines au moyen de Mytilus galloprovincialis ou de Mytilus
edulis
Une autre méthode très utile pour établir ou écarter la présence de biotoxines du type
PSP ou NSP dans l'eau de mer anormalement colorée consiste à filtrer l'eau de mer
dans des bacs de 100 litres contenant des moules en bonne santé sur une période de
plusieurs jours jusqu'à ce que l'eau devienne transparente ou claire et, si nécessaire,
de répéter l'opération pendant une semaine (Viviani, 1977a). Les biotoxines de type
hydrosoluble (AOAC, 1970) et liposoluble (McFaren et al., 1965) sont extraites des
moules et testées chez des souris.
(d) Test de l'hémolyse des globules sanguins de souris d'extraits obtenus à partir
d'eaux algales ou de moules
L'épreuve biologique utilisant du poisson nécessite habituellement des quantités
relativement importantes d'échantillons, car le matériel à tester doit être dissous dans
d'assez gros volumes d'eau pour conserver le poisson à tester. En outre, les réponses
dose-délai de survie du poisson sont souvent fluctuantes. Pour surmonter la difficulté
et utiliser une méthode d'épreuve rapide et sensible, on a appliqué un test hémolytique
de dépistage des ichtyotoxines. De fait, de nombreuses ichtyotoxines comme celles
de Prymnesium parvum (Shilo, 1967), Amphidinium carteri (Yasumoto et al., 1987),
Chrysochromulina polylepis (Yasumoto et al., 1990) et la maïtotoxine de
Gambierdiscus toxicus (Nakajima et al., 1981) sont des