Histologia Básica, Texto e Atlas - 12ª Edição - Junqueira & Carneiro

1 1 Métodos de Estudo em Histologia
- .. ~
Célula intacta
~==
Qil!·~ ~"":.
t?t?,. -~~~
..
º~ (€;
, ... '
\),,~·.• "'" -.,.h
@·' . o i~~!
~~""" ..
A
~ Células dissociadas
..
•
·~ .....,.
A
B
e
D
o
s
Núcleos
G© ~
GG
Mitocôndrias e
lisossomos
• • • • • •
·... .•, .., .
~- , ·'1 . ... . i ·' . . ·'
•.
•.. ,..
,,
ti
Microssomos
o o o
ºoº&, o 9i º o º
O t. 0 • goº oo
o o • o o 'º
~ o 0 ºo oº~ 0 o
• , 8 o o ºº o
..
E
Ribossomos
!~;~#~:;;:;
B
F
Membranas do retículo
endoplasmático
o o
oº"ºººº
'? o ~ o o
o O o& 0 º.oJJ~O
ôo ººO• ooOoº o
o ()O• 0 • o Ô o
00
o o
oººº ººº
ººº ººº
fracionamento celular possibilita o isolamento decomponentes da célula
Figura 1.13 O
por meio de centrifugação diferencial. A coluna de desenhos à direita da figura mostra as
organelas celulares obtidas ao fundo de cada tubo após cada centrifugação. A força centrífuga
é expressa em unidades g, equivalentes à força da gravidade. A. Um fragmento de
tecido é picado com uma navalha de barbear ou com tesoura e depois dissociado com um
homogeneizador ou por ultrassom. B. O tecido dissociado permanece em repouso durante
cerca de 20 min para quegrumos não dissociados e fibras da matriz extracelularprecipitem.
C. O sobrenadanteé centrifugado a 1.000g por 20 min. Os núcleos são precipitados no fundo
do tubo. D. O sobrenadante é centrifugado a 10.000 g por 20 min. Mitocôndrias e lisossomos
precipitam. E. O sobrenadante é centrifugado a 105.000 g por 120 min. Os microssomos
precipitam. F. Seo sobrenadante é tratado com desoxicolato de sódio antes da centrifugação,
os microssomos se dissociam e precipitam separadamente como ribossomos e membranas
do retículo endoplasmático granuloso. (Adaptada e reproduzida, com autorização, de Bloom
W, Fawcett DW:A TextbookafHistology, 9th ed. Saunders, 1968.)
e
Figura 1.14 Micrograflas eletrônicas de três frações celulares isoladas por centrifugação
em gradiente de densidade. A. Fração de mitocôndrias contaminada com retículo
endoplasmático. B. Fração de mlcrossomos. C. Fração de lisossomos. (Grande aumento.
Cortesia de P. Baudhuin.)