Histologia Básica, Texto e Atlas - 12ª Edição - Junqueira & Carneiro

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Proteína X
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Histologia Básica
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Figura 1.20 Técnica direta de imunoàtoquímica. A. Molécula de imunoglobulina (lg).
B. Produção de anticorpo policlonal. A
proteína X
de um rato é injetada em um animal de
outra espêóe, por exemplo, um coelho. Várias imunoglobulinas {lg) de coelho são produzidas
contra diferentes regiões da proteína X. C. Marcação do anticorpo. As lg de coelho são acopladas
a um marcador visível por microscopia. D. Reação imunocitoqufmica. Aslg marcadas
reconhecem e se ligam a diferentes porções da proteína XencontJadas em um corte. Em um
microscópio, os locais do c01te que contêm a proteína X
podem ser reconhecidos.
Figura 1.21 Témica indireta de imunocitoquímica. A. Produção de um anticorpo polidonal
primário. A
proteína X
exemplo, um coelho. Várias lg de coelho são produzidas contra a proteína X
de um rato é injetada em um animal de outra espécie, por
de rato, B. Produção
de um anticorpo secundário. lg de outJo coelho, normal e não imunizado, é isolada e
injetada em um animal de uma terceira espécie, por exemplo, uma cabra. São produzidas
lg de cabra contra lgsde coelho. As lg de cabra são purificadas e acopladas a um marcador.
C. Primeira etapa da reação imunocitoquímica. As lg de coelho reconhecem e se ligam a
diferentes porções da proteína X. D. Segunda etapa da reação imunocitoquímica. As lg de
cabra marcadas reconhecem e se ligam às lg de coelho, indicando a existência da proteína X.
Em um microscópio, os locais do CO/te que contêm a proteína X
podem ser reconhecidos.
Quando se oferece um antígeno X a tun animal, vários
grupos (clones) de linfócitos deste animal podem reconhecer
porções diferentes de X e os vários grupos de linfócitos
produzem anticorpos diferentes contra as várias
porções, resultando em uma mistura de anticorpos. Essa
mistura constitui o que se chama de anticorpo polidonaJ.
~ possível, por outro lado, fornecer a proteína X para
linfócitos mantidos em cultura (na verdade são linfócitos
que foram fundidos com células de um tumor). Os diferentes
grupos (clones) de linfócitos produzirão anticorpos
diferentes contra as várias porções da proteína X. Cada
clone pode ser isolado e cultivado isoladamente, de modo
que os diferentes anticorpos contra X podem ser coletados
separadamente. Cada um desses anticorpos constitui
um anticorpo monoclonal Há várias vantagens em usar
um anticorpo monoclonal em comparação a um anticorpo
policlonal; por exemplo, eles costtu11am ser ma.is específicos
(e, portanto, mais precisos no reconhecimento da proteína X).
Por esse motivo, haverá menos ligações inespecíficas com
outras proteínas as quais podem causar resultados falsopositivos.
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Histologia aplicada
A imunocitoqufmica contribuiu significativamente para a pesquisa
em biologia celular e para o aprimoramento de procedimentos diagnós·
ticos. As Figuras 1.22 a 1.26 contêm exemplos de detecção imunocitoquí·
mica de moléculas. A Tabela 1.1 mostra algumas das aplicações rotinei·
ras de procedimentos de imunoátoquimica na prática clínica.
• Técnicas de hibridização
O desafio central da moderna biologia celular é entender
o funcionan1ento das células em seus detalhes moleculares.
Esse objetivo requer técnicas que viabilizem a análise das
moléculas envolvidas no processo de fluxo de informação