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Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

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Ergebnisse<br />

Im Gegensatz zu den Untersuchungen bei Rinderfleischerzeugnissen waren bei den<br />

Versuchsreihen 1 <strong>und</strong> 2 auch bei den nicht mit Schweinegehirngewebe dotierten Proben ein<br />

168 bp großes GFAP-mRNA-Signal detektierbar (Tabelle 34). Somit traten bei vier <strong>von</strong> 18<br />

nicht mit Gehirngewebe dotierten Proben falsch positive GFAP-mRNA <strong>Nachweis</strong>e auf.<br />

Falsch negative Resultate wurden nicht nachgewiesen.<br />

In Abbildung 5 ist beispielhaft <strong>Nachweis</strong> der GFAP-mRNA aus einer mit porcinem<br />

Gehirngewebe dotierten Brühwurst (Versuch 2, Tag 14) dargestellt. Die 168 bp großen<br />

Banden bei den einzelnen Konzentrationsstufen zeigen hierbei das Amplifikationsprodukt der<br />

porcinen GFAP-mRNA. Die etwa 950 bp großen Banden bei den Konzentrationsstufen 0 %,<br />

0,25 % <strong>und</strong> 0,5 % zeigen das Amplifikationsprodukt der genomischen DNA des porcinen<br />

GFAP-Gens.<br />

Marker<br />

0 %<br />

0,25 %<br />

0,5 %<br />

1 %<br />

5 %<br />

100 %<br />

DNA-Positivkontrolle<br />

Negativkontrolle RT-PCR<br />

Negativkontrolle PCR<br />

Marker<br />

168 bp<br />

Abb. 5: GFAP-mRNA <strong>Nachweis</strong> aus einer mit porcinem Gehirngewebe dotierten<br />

Brühwurst<br />

Beispiel einer Auswertung der RT-PCR (aus Kapitel 4.2.2.1, Versuch 2, Tag 14)<br />

mittels Agarosegelelektrophorese (2,5 %iges Agarosegel).<br />

Marker puC 19/Msp I (Bandengrößen <strong>von</strong> oben nach unten: 489/501 bp, 404 bp,<br />

331 bp, 242 bp, 190 bp, 147 bp,110/111 bp)<br />

Negativkontrollen <strong>von</strong> RT-PCR <strong>und</strong> PCR (s. Kapitel 3.2.3.2 <strong>und</strong> 3.2.3.3)<br />

Positivkontrolle <strong>von</strong> PCR bestehend aus porciner DNA (s. Kapitel 3.2.3.3.3)<br />

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