Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
Ergebnisse<br />
Im Gegensatz zu den Untersuchungen bei Rinderfleischerzeugnissen waren bei den<br />
Versuchsreihen 1 <strong>und</strong> 2 auch bei den nicht mit Schweinegehirngewebe dotierten Proben ein<br />
168 bp großes GFAP-mRNA-Signal detektierbar (Tabelle 34). Somit traten bei vier <strong>von</strong> 18<br />
nicht mit Gehirngewebe dotierten Proben falsch positive GFAP-mRNA <strong>Nachweis</strong>e auf.<br />
Falsch negative Resultate wurden nicht nachgewiesen.<br />
In Abbildung 5 ist beispielhaft <strong>Nachweis</strong> der GFAP-mRNA aus einer mit porcinem<br />
Gehirngewebe dotierten Brühwurst (Versuch 2, Tag 14) dargestellt. Die 168 bp großen<br />
Banden bei den einzelnen Konzentrationsstufen zeigen hierbei das Amplifikationsprodukt der<br />
porcinen GFAP-mRNA. Die etwa 950 bp großen Banden bei den Konzentrationsstufen 0 %,<br />
0,25 % <strong>und</strong> 0,5 % zeigen das Amplifikationsprodukt der genomischen DNA des porcinen<br />
GFAP-Gens.<br />
Marker<br />
0 %<br />
0,25 %<br />
0,5 %<br />
1 %<br />
5 %<br />
100 %<br />
DNA-Positivkontrolle<br />
Negativkontrolle RT-PCR<br />
Negativkontrolle PCR<br />
Marker<br />
168 bp<br />
Abb. 5: GFAP-mRNA <strong>Nachweis</strong> aus einer mit porcinem Gehirngewebe dotierten<br />
Brühwurst<br />
Beispiel einer Auswertung der RT-PCR (aus Kapitel 4.2.2.1, Versuch 2, Tag 14)<br />
mittels Agarosegelelektrophorese (2,5 %iges Agarosegel).<br />
Marker puC 19/Msp I (Bandengrößen <strong>von</strong> oben nach unten: 489/501 bp, 404 bp,<br />
331 bp, 242 bp, 190 bp, 147 bp,110/111 bp)<br />
Negativkontrollen <strong>von</strong> RT-PCR <strong>und</strong> PCR (s. Kapitel 3.2.3.2 <strong>und</strong> 3.2.3.3)<br />
Positivkontrolle <strong>von</strong> PCR bestehend aus porciner DNA (s. Kapitel 3.2.3.3.3)<br />
91