Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Inhaltsverzeichnis
2.4.4 Direkter Nachweis von PrP SC ................................................................................... 26
2.4.5 Molekularbiologische Methoden zum Nachweis von mRNA ................................. 27
2.5 Reverse Transkriptase-Polymerase Kettenreaktion (RT-PCR)................................ 29
2.6 Polymerase-Kettenreaktion-Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus (PCR-
RFLP) ....................................................................................................................... 30
2.7 Stabilität der mRNA................................................................................................. 32
2.8 Saures Gliafaserprotein (GFAP) .............................................................................. 34
3 Material und Methoden ......................................................................................... 36
3.1 Material .................................................................................................................... 36
3.1.1 Organe und Gewebe ................................................................................................. 36
3.1.1.1 Zentrales Nervengewebe .......................................................................................... 36
3.1.1.2 Peripheres Nervengewebe ........................................................................................ 38
3.1.1.3 Organe und Gewebe vom Schwein .......................................................................... 38
3.1.1.4 Organe und Gewebe vom Schaf............................................................................... 38
3.1.2 Rohstoffe für die Fleischerzeugnisse ....................................................................... 39
3.1.2.1 Fleisch ...................................................................................................................... 39
3.1.2.2 Fett............................................................................................................................ 39
3.1.2.3 Leber......................................................................................................................... 39
3.1.3 Zutaten und Zusatzstoffe für die Herstellung von Fleischerzeugnissen................... 40
3.1.4 Chemikalien und Enzyme ........................................................................................ 40
3.1.5 Puffer und Lösungen ................................................................................................ 42
3.1.6 Laborgeräte, Laborhilfsmittel und Verbrachsmaterialien ........................................ 42
3.1.7 Geräte für die Herstellung von Fleischerzeugnissen................................................ 43
3.2 Methoden.................................................................................................................. 44
3.2.1 Herstellung der Brühwurstgrundmasse .................................................................... 44
3.2.1.1 Brühwurstgrundmasse mit Rindermuskulatur.......................................................... 44
3.2.1.1.1 Brät für pasteurisierte Brühwursterzeugnisse........................................................... 44
3.2.1.1.2 Brät für stark erhitze Brühwursterzeugnisse ............................................................ 45
3.2.1.2 Brühwurstgrundmasse mit Schweinemuskulatur ..................................................... 45
3.2.1.2.1 Brät für pasteurisierte Brühwursterzeugnisse........................................................... 45
3.2.2 Leberwurst................................................................................................................ 46
3.2.3 Molekularbiologische Methoden.............................................................................. 47
3.2.3.1 RNA-Extraktion ....................................................................................................... 47
3.2.3.2 Reverse Transkription .............................................................................................. 48
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