Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
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Ergebnisse<br />
4.4 Restriktionsfragment-Längenpolymorphismus (RFLP)<br />
Durch den restriktionsenzymatischen Spaltungsvorgang sollten die GFAP-mRNA-<br />
Amplifikate der verschiedenen Tierarten unterschieden werden. Verwendet wurden die in der<br />
nachfolgenden Tabelle (Tabelle 35) zusammengefassten Restriktionsenzyme.<br />
Tabelle 35: Darstellung der Bandenmuster der GFAP-mRNA-Fragmente bei Aufspaltung<br />
mit verschiedenen Restriktionsendonukleasen<br />
Enzym Hae III Alu I Mbo I Msc I Msp I Sst I<br />
Schnittstelle<br />
GG ▼ CC AG ▼ CT<br />
▼ GATC TGG ▼ CCA C ▼ CGG GAGCT ▼ C<br />
5´.....3´<br />
CC ▲ GG TC ▲ GA ▲CTAG ACC ▲ GGT G ▲ GCC CTCGA ▲ G<br />
3´....5´<br />
Tierart<br />
(Fragmentlänge in bp)<br />
Schwein<br />
Wildschwein<br />
Rind<br />
Schaf<br />
Pferd<br />
Damwild<br />
Rehwild<br />
Rotwild<br />
140<br />
28<br />
140<br />
28<br />
86<br />
45<br />
28<br />
86<br />
49<br />
33<br />
86<br />
33<br />
28<br />
21<br />
86<br />
49<br />
33<br />
86<br />
33<br />
28<br />
21<br />
86<br />
33<br />
28<br />
21<br />
86<br />
82<br />
86<br />
82<br />
86<br />
70<br />
12<br />
86<br />
70<br />
12<br />
70<br />
59<br />
27<br />
12<br />
86<br />
70<br />
12<br />
86<br />
70<br />
12<br />
86<br />
70<br />
12<br />
123*<br />
39<br />
6<br />
123*<br />
39<br />
6<br />
105<br />
45<br />
18<br />
82<br />
45<br />
23<br />
18<br />
105<br />
27<br />
18<br />
18<br />
105<br />
45<br />
18<br />
*bei Verwendung der Primer GFAPforw <strong>und</strong> GFAPrev entsteht das Fragmentmuster 105, 45,<br />
18<br />
97<br />
105<br />
45<br />
18<br />
105<br />
45<br />
18<br />
168 168 168<br />
168 168 168<br />
168<br />
117<br />
51<br />
117<br />
51<br />
117<br />
51<br />
117<br />
51<br />
117<br />
51<br />
137<br />
31<br />
137<br />
31<br />
94<br />
43<br />
31<br />
137<br />
31<br />
137<br />
31<br />
137<br />
31<br />
96<br />
72<br />
168<br />
72<br />
57<br />
39<br />
96<br />
72<br />
96<br />
72<br />
96<br />
72