Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Ergebnisse
möglich (Abbildung 9). Das Pferd weist ebenfalls ein dreibandiges Fragmentmuster auf, das
sich von den beiden oben genannten Fragmentmuster unterscheidet (Tabelle 35). Das Schaf
weist bei der enzymatischen Spaltung mit Mbo I ein vierbandiges Fragmentmuster auf
(Tabelle 35, Abbildung 9), und ist somit von dem Rind unterscheidbar.
Mit dem Restriktionsenzym Msc I ließen sich die Tierarten Schwein, Wildschwein und Rind,
deren 168 bp großes GFAP-mRNA-Fragment nicht gespalten wurde, von den restlichen
Tierarten unterscheiden, die ein zweibandiges Fragmentmuster aufwiesen. Somit war mit
diesem Restriktionsenzym eine Unterscheidung zwischen Rind und Schaf möglich
(Tabelle 35, Abbildung 9).
Auch mit dem Restriktionsenzym Sst I konnte zwischen Rind und Schaf unterschieden
werden, da die Tierarten Schwein, Wildschwein und Schaf, deren 168 bp großes GFAPmRNA-Fragment
nicht gespalten wurde, von den Tierarten Rind, Damwild, Rehwild und
Rotwild, die ein zweibandiges Fragmentmuster aufwiesen, unterscheidbar waren. Das Pferd
war durch sein dreibandiges Muster von den beiden oben genannten Tierarten ebenfalls
unterscheidbar (Tabelle 35). Allerdings konnten bei der Tierart Pferd Bandenmuster
beobachtet werden, die auf eine unvollständige enzymatische Spaltung durch das
Restriktionsenzym Sst I zurückzuführen sind (Abbildung 9).
Zusammenfassend waren mit den gewählten Restriktionsenzymen die Tierarten Rind, Schaf,
Pferd, Damwild sowie die Tiergruppen Schwein – Wildschwein und Rehwild – Rotwild
voneinander unterscheidbar. Durch die Spaltung mit den gewählten Restriktionsenzymen
konnten die Sequenzdaten aus der Sequenzierung bestätigt werden (s. Kapitel 4.3, Tabelle 35,
Abbildung 9). Insgesamt wurde Gehirngewebe von 10 Schweinen, 1 Wildschwein, 8 Rindern,
14 Schafen, 8 Pferden, 2 Damwild, 1 Rehwild und 1 Rotwild mittels der RFLP hinsichtlich
der innertieartlichen Varianz untersucht. Es konnte bei keiner dieser Tierarten eine Varianz
der RFLP des 168 bp langen GFAP-mRNA-Amplifikats festgestellt werden.
In Abbildung 9 ist die Auswertung der enzymatischen Spaltung des 168 bp großen
Amplifikats der GFAP-mRNA der RT-PCR mit den Primern GFAPforw und GFAPrev mit
den verschiedenen Restriktionsenzyme mittels Agarosegelelektrophorese in einem 3,75
prozentigen Gel bei den verschiedenen Tierarten dargestellt.
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