Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Diskussion
zeitlich verlegt ist, wie z.B. bei Oozyten (SPIRIN 1994). In einer Studie von LUKIW et al.
(1990) hatte die mRNA von GFAP, neben der mRNA des humanen Neurofilament L,
postmortal eine relativ lange Halbwertszeit (HWZ). In weiteren Studien zur postmortalen
Stabilität von mRNA an humanem Gehirngewebe zeigte sich, dass ein langsamer
Gefrierprozess die Stabilität der mRNA negativ beeinflussen kann (JOHNSTON et al. 1997).
Tiefgekühlt wurde die mRNA in humanem Gehirngewebe dagegen kaum geschädigt
(BURKE et al. 1991; LEONARD et al. 1993; EASTWOOD et al. 1995; YASOJIMA et al.
2001) und konnte noch 1 – 2 Stunden nach dem Auftauen zuverlässig nachgewiesen werden
(YASOJIMA et al. 2001).
In der Literatur werden fünf Untergruppen von GFAP-mRNA unterschieden. GFAP-αmRNA
repräsentiert die stärkste Untergruppe und ist hauptsächlich in Astrozyten zu finden
(BRENNER 1994; FUCHS u. WEBER 1994). Daneben existieren noch GFAP-βmRNA in
den Zellen des PNS, GFAP-γmRNA, die in Zellen außerhalb des Gehirns expremiert wird,
sowie GFAP-δmRNA und GFAP-εmRNA, die im ZNS expremiert werden (BRENNER
1994).
Neben den Verfahren, die auf dem Nachweis des Proteins (GFAP) als Marker für ZNS-
Gewebe beruhen, wurden auch molekularbiologische Verfahren entwickelt, die auf dem
Nachweis gewebespezifisch expremierter GFAP-mRNA basieren (LANGE et al. 2002;
SEYBOLDT et al. 2003). Hierbei kann, bei gegebener Gewebespezifität, die in der mRNA
enthaltene Sequenzinformation zum tierartspezifischen Nachweis des detektierten ZNS-
Gewebe genutzt werden (SEYBOLDT et al. 2003). Untersuchungen zur Gewebespezifität der
GFAP-mRNA beim Rind ergaben, dass aus nativen zerkleinerten Herz-, Muskel- und ZNS-
Gewebe über den Zeitraum von sieben Tagen ein positives GFAP-mRNA Signal detektiert
werden konnte (SEYBOLDT et al. 2003). Nach Einwirkung von Hitze (70°C, 20 min.) waren
die Signale von Herz- und Muskelgewebe jedoch nicht mehr nachweisbar und damit die
Gewebespezifität dieser Nachweismethode gegeben (SEYBOLDT et al. 2003).
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