Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
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Ergebnisse<br />
4.1.2.4 Untersuchung erhitzter Gewebe (95°C, 30 Minuten, 95°C, 60 Minuten)<br />
Beim Schaf haben die Ergebnisse aus Versuch 4.1.2.3 gezeigt, dass die GFAP-mRNA-<br />
Signale <strong>von</strong> Muskulatur- <strong>und</strong> Herzgewebe nach einer Erhitzung auf 80°C im Wasserbad für<br />
30 Minuten nicht ausreichend inaktiviert wurden. Deshalb wurde auch an Schafgeweben<br />
weitere Versuche mit höherer <strong>und</strong> längerer Temperatureinwirkung durchgeführt, um zu<br />
untersuchen, ob die Signale der GFAP-mRNA dadurch zu inaktivieren waren.<br />
Tabelle 24: <strong>Nachweis</strong> <strong>von</strong> GFAP-mRNA aus nativen <strong>und</strong> erhitzten Schafgeweben (95°C,<br />
30 min, 95°C, 60 min)<br />
Versuche 1 – 3<br />
Gewebe<br />
nativ<br />
95°C für 30 95°C für 60<br />
Minuten<br />
Minuten<br />
T 0 a T 1 b T 0 a T 1 b T 0 a T 1 b<br />
Muskulatur +/+/+ +/+/- +/+/+ -/-/+ -/+/+ +/+/+<br />
Herz +/+/+ +/-/- +/-/- -/-/- +/-/- -/-/-<br />
Rückenmark +/+/+ +/+/+ +/+/+ +/+/+ +/+/+ +/+/+<br />
a T 0: 4 h p.m.; b T 1: 24h p.m.<br />
Bei den Untersuchungen des Schafgewebes hatte sich herausgestellt, dass die Signale der<br />
GFAP-mRNA aus Herz- <strong>und</strong> Muskelgewebe durch die hier angewandte Hitzeeinwirkung<br />
nicht sicher zu inaktivieren waren (Tabelle 24). Trotz der höheren Temperatur <strong>und</strong> der<br />
längeren Hitzeeinwirkung ergaben sich im Vergleich zu Versuch 4.1.2.3 keine Änderungen in<br />
der Aktivität der GFAP-mRNA-Signale (Tabelle 23 <strong>und</strong> 24). Bei Herzgewebe war nur an<br />
Tag 1 ein negativer GFAP-mRNA <strong>Nachweis</strong> feststellbar (Tabelle 24).<br />
4.1.2.5 Untersuchung tiefgekühlter (-20°C, 24 St<strong>und</strong>en) <strong>und</strong> nachfolgend erhitzter<br />
Gewebe (80°C, 20 Minuten)<br />
Basierend auf Untersuchungen mit porcinen Geweben, wurde bei Muskulatur- <strong>und</strong><br />
Herzgewebe des Schafes die Einwirkung <strong>von</strong> Kälte auf die <strong>Nachweis</strong>barkeit der GFAPmRNA<br />
Signale untersucht. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen sind in der nachfolgenden<br />
Tabelle 25 zusammengefasst.<br />
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