Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

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5.1 Saures Gliafaserprotein (GFAP) als Marker für ZNS-Gewebe in
Fleischerzeugnissen
Das saure Gliafaserprotien (GFAP) gehört zu den Typ III Intermediärfilamentproteinen (IF),
die im Zentrum eine hoch konservierte α-Helix Struktur aufweisen, die von nicht helicalen
Kopf- und Schwanz-Domänen flankiert werden (BRENNER 1994; FUCHS u. WEBER 1994;
NIELSEN et al. 2002). GFAP zählt zu den wichtigsten Strukturproteinen der reifen
Astrogliazellen (FUCHS u. CLEVELAND 1998). Das GFAP kommt somit hauptsächlich in
Geweben des zentralen (ZNS) und peripheren Nervensystems (PNS) vor (ENG et al. 2000).
Im ZNS-Gewebe sind hohe Gehalte an GFAP enthalten. Das Rückenmarkgewebe enthält mit
55000-220000 ng/mg, gemessen im colorimetrischen ELISA, die höchsten Konzentrationen
an GFAP (Schmidt et al. 1999). Das Gehirngewebe enthält mit 9000-55000 ng/mg ein Drittel
und die peripheren Nerven, wie der Nervus ischiadicus, mit 13,5-51 ng/mg weniger als 1 %
des GFAP-Gehaltes des Rückenmarks (Schmidt et al. 2001).
Aufgrund des hauptsächlich gewebespezifischen Auftretens des GFAP, kann es als Marker
zum Nachweis von ZNS-Gewebe in Fleisch und Fleischerzeugnissen genutzt werden. Zur
Zeit existieren folgende Nachweisverfahren zum Nachweis von GFAP in mit Gehirngewebe
dotierten Fleischerzeugnissen: (a) immunchemische Nachweisverfahren, zu denen der GFAP-
Westernblot (LÜCKER et al. 2000; OVERHOFF et al. 2002) und der Immunosorbent-F-
ELISA (SCHMIDT et al. 1999a, 2001) gehören und (b) immunhistochemische
Nachweisverfahren mit Antikörpern gegen GFAP (LOVE et al. 2000; TERSTEEG et al.
2002; AUPERLE et al. 2002; LÜCKER et al. 2002a).
5.1.1 GFAP-mRNA als Marker für ZNS-Gewebe in Fleischerzeugnissen
Die Regulation der Stabilität der mRNA in Säugetierzellen ist sehr komplex (ROSS 1995;
GUHANIYOGI u. BREWER 2001) und die Halbwertszeiten reichen wenigen Minuten bis zu
über 24 Stunden. Stabile mRNAs kodieren meist für reichlich vorhandene und hochkonservierte
Proteine (ROSS 1995) oder stammen aus Geweben, bei denen die Translation
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