Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Material und Methoden
Tabelle 14: Dotierung des Brätes mit bovinem peripheren Nervengewebe
Konzentration
im
Fleischerzeugnis
Einwaage an Brät
Einwaage an peripheren
Nervengewebe (PNS)
0 % 100 g 0 g
0, 25 % 199,5 g 0,5 g
0,5 % 199 g 1 g
1 % 99 g 1 g
5 % 95 g 5 g
Die jeweiligen Brät-PNS-Gemische wurden anschließend nochmals in der Moulinette
vermengt, um eine möglichst homogene Verteilung des peripheren Nervengewebes in der
Brühwurstmasse zu gewährleisten. Dann wurden je 100 g abgewogen und separat in 200 ml
Probengefäße unter Vermeidung von größeren Luftblasen eingefüllt. Zusätzlich wurden bei
dieser Versuchsreihe 10 g natives, bovines peripheres Nervengewebe und 10 g natives
Gehirngewebe vom Kalb als Kontrollen jeweils separat in ein 15 ml Zentrifugenröhrchen
gefüllt. Nachfolgend wurden die Probengefäße für 65 Minuten in ein Wasserbad mit 75°C
Wassertemperatur verbracht und von den abgekühlten Brühwurstprodukten, dem erhitzten
peripheren Nervengewebe sowie dem bovinen Gehirngewebe jeweils eine Probe von 100 mg
für die RNA-Extraktion entnommen. Parallel wurde als Positivkontrolle eine Probe von
100 mg des nativen, bovinen peripheren Nervengewebes für die RNA-Extraktion gezogen.
Diese Versuchsreihe wurde insgesamt dreimal durchgeführt.
3.2.6 Untersuchungen zum Einfluss fleischtechnologischer Parameter auf den
Nachweis porciner GFAP-mRNA
3.2.6.1 Herstellung einer mit Gehirngewebe dotierten Brühwurst bei 80°C
Wasserbadtemperatur
Brät für pasteurisierte Brühwursterzeugnisse (Kapitel 3.2.1.2.1) wurde mit porcinem,
homogenisierten Gehirngewebe (Kapitel 3.1.1.1) wie folgt für die verschiedenen
Konzentrationsstufen vermengt (Tabelle 15):
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