Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Ergebnisse
4.2.1.4 Nachweis von GFAP-mRNA aus mit Rindergehirn dotierten Leberwürsten
Bei der Herstellung der Leberwürste konnte aufgrund der Brühbedingungen (in einem großen
Kochkessel) keine Temperaturkurve ermittelt werden (s. Kapitel 3.2.5.2). Deswegen ist die
Kerntemperatur der bei 80°C für 75 Minuten gebrühten Leberwürste bei diesem
Versuchsaufbau nicht bekannt. Bei der RNA-Extraktion wurde bei der Untersuchung der
Leberwürste ein zusätzlicher Zentrifugationsschritt eingefügt, da in einem ersten Versuch bei
Verwendung der herkömmlichen RNA-Extraktion (s. Kapitel 3.2.3.1) bei der Detektion des
GFAP-mRNA-Signals mittels Agarosegelelektrophorese optisch schwache Banden
nachweisbar waren.
Die Signale des 168 bp großen GFAP-mRNA-Amplifikats sind in der nachfolgenden
Tabelle 30 mit einem „+“ für den Nachweis des 168 bp großen GFAP-mRNA-Amplifikats
durch RT-PCR und mit einem „−“ für ein negatives Ergebnis der RT-PCR zusammenfassend
für die drei durchgeführten Versuche dargestellt.
Tabelle 30: Nachweis von GFAPmRNA aus mit Rindergehirn (%) dotierten Leberwürsten
über einen Zeitraum von 35 Tagen (T)
Versuch 1 Versuch 2 Versuch 3
T
%
0 0,25 0,5 1 5 0 0,25 0,5 1 5 0 0,25 0,5 1 5
0 - + + + + - + + + + - + + + +
7 - - + + + - + + + + - - + + +
14 - + + + + - + + + + - + + + +
21 - + + + + - + + + + - + + + +
28 - + + + + - + + + + - + + + +
35 - + + + + Proben wegen hgr. Verderb verworfen
Bei dieser Versuchsreihe wurde erneut deutlich, dass bei den nicht mit Rindergehirngewebe
dotierten Leberwurstprodukten keine falsch positiven Signale der GFAP-mRNA auftraten
(Tabelle 30). In den mit Rindergehirn dotierten Leberwürsten waren von insgesamt 64
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