Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...
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Ergebnisse<br />
zusammengefasst. Hierbei steht ein „+“ für den <strong>Nachweis</strong> des 168 bp großen GFAP-mRNA-<br />
Amplifikats durch RT-PCR, <strong>und</strong> ein „−“ für ein negatives Ergebnis der RT-PCR.<br />
Die Aufzeichnungen der Kerntemperatur, die mit einem Temperaturmessfühler in Form eines<br />
Thermometers ermittelt wurden, ergaben, dass bei diesem Versuchsansatz eine<br />
Kerntemperatur <strong>von</strong> 89 °C erreicht wurde, die für den Zeitraum <strong>von</strong> mindestens 20 Minuten<br />
gehalten werden konnte.<br />
Tabelle 28: <strong>Nachweis</strong> <strong>von</strong> GFAP-mRNA aus mit Rindergehirn (%) dotierter Brühwurst<br />
vom Rind (Brühtemperatur 95°C) über einen Zeitraum <strong>von</strong> 28 Tagen (T)<br />
Versuch 1 Versuch 2 Versuch 3<br />
T<br />
%<br />
0 0,25 0,5 1 5 100 0 0,25 0,5 1 5 100 0 0,25 0,5 1 5 100<br />
0 - + + + + + - + + + + + - + + + + +<br />
7 - + + + + + - + + + + + - + + + + +<br />
14 - - - + + + - - + - - + - + + + + +<br />
21 - + - + + + - + + + + + - + + + + +<br />
28 - + + + + + - + + + + + - + + + + +<br />
Auch bei dieser Versuchsreihe wurde deutlich, dass zum einen keine falsch positiven<br />
<strong>Nachweis</strong>e <strong>von</strong> GFAP-mRNA auftraten. Zum anderen war das Signal der GFAP-mRNA bei<br />
den mit Rindergehirngewebe dotierten Brühwursterzeugnissen trotz der höheren<br />
Hitzeeinwirkung ab einer Gehirngewebe-Konzentration <strong>von</strong> 0,25 % für den Probenzeitraum<br />
<strong>von</strong> 28 Tagen nachweisbar. Falsch negative Ergebnisse wurden in sechs <strong>von</strong> 60 dotierten<br />
Brühwürsten erhalten. Dabei war keine Abhängigkeit <strong>von</strong> der Konzentration des Hirngewebes<br />
sowie <strong>von</strong> der Lagerdauer <strong>und</strong> den nachgewiesenen falsch negativen Ergebnissen erkennbar.<br />
4.2.1.3 <strong>Nachweis</strong> <strong>von</strong> GFAP-mRNA aus mit Rindergehirn dotierten Brühwürsten<br />
(Gartemperatur 100°C)<br />
Bei diesen Versuchen wurden die Brühwursterzeugnisse bei 100°C für 65 Minuten im<br />
Wasserbad hergestellt (s. Kapitel 3.2.5.1.3), um den Einfluss <strong>von</strong> hoher<br />
Temperatureinwirkung auf den <strong>Nachweis</strong> <strong>von</strong> GFAP-mRNA zu testen. Zur Herstellung der<br />
mit <strong>bovinem</strong> Gehirngewebe (s. Kapitel 3.2.1.1) dotierten Brühwürste wurde die Brätmasse für<br />
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