Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Material und Methoden
Probengefäß mit 100 g Brät mitgeführt, bei dem die Kerntemperatur in der Probe erfasst
wurde.
3.2.5.1.2 Herstellung einer mit Gehirngewebe dotierten Brühwurst bei 95°C
Wasserbadtemperatur
Das Brät für pasteurisierte Brühwursterzeugnisse (Kapitel 3.2.1.1.1) wurde wie in 3.2.5.1.1
beschrieben mit verschiedenen Konzentrationen an bovinem Gehirngewebe dotiert. Die
einzelnen Brät-Rindergehirn-Gemische wurden anschließend nochmals in der Moulinette
vermengt, um eine möglichst homogene Verteilung des Gehirngewebes in der Brätmasse zu
gewährleisten. Von diesen Gemischen wurden je 100 g abgewogen und jeweils separat in
200 ml Probengefäße unter Vermeidung von größeren Luftblasen eingefüllt. 10 g natives
Gehirngewebe vom Kalb, die in ein 15 ml Zentrifugenröhrchen eingefüllt wurden, dienten als
Positivkontrolle. Zusätzlich wurden 100 g eines nicht mit Gehirngewebe dotierten Brätes in
einem 200 ml Probengefäß mitgeführt, in das ein Temperaturmessfühler in Form eines
Thermometers gegeben wurde, um den Verlauf der Kerntemperatur zu verfolgen. Die
Reaktionsgefäße wurden nachfolgend für 65 Minuten im Wasserbad mit einer Temperatur
von 95°C gebrüht. Dann wurde von den abgekühlten Brühwurstprodukten jeweils eine Probe
von 100 mg zur RNA-Extraktion entnommen. Die weitere Beprobung fand im wöchentlichen
Abstand für den Zeitraum von 35 Tagen statt. Diese Versuchsreihe wurde insgesamt dreimal
durchgeführt.
3.2.5.1.3 Herstellung einer mit Gehirngewebe dotierten Brühwurst bei 100°C
Wasserbadtemperatur
Brät für sterilisierte Brühwursterzeugnisse (Kapitel 3.2.1.1.2) wurde mit Gehirngewebe vom
Kalb wie folgt mit der Moulinette gemischt und je 100 g in 200 ml Probengefäße eingefüllt
(Tabelle 11):
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