Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Wissenschaftliches Schrifttum
2.4 Methoden zur Detektion von ZNS in Fleisch- und Fleischerzeugnissen
Als mögliche Markersubstanzen für das ZNS-Gewebe eignen sich Stoffwechselprodukte,
Struktur- und Stoffwechselproteine sowie Produkte der gewebespezifischen Genexpression.
Die Markersubstanzen sollten spezifisch für das ZNS-Gewebe, hitzestabil und für mögliche
Detektions-Tests gut verfügbar sein. Zu den Stoffwechselprodukten, die als Marker für ZNS
eingesetzt werden, gehören (a) die Nervonsäure, die zu den Glykosphingolipiden gehört und
in der weißen Substanz des ZNS zu finden ist (ANONYM 1994a) sowie (b) das Cholesterin,
einem einwertigen hydroaromatischen Kohlenwasserstoff, der Baustein von Membranen ist
und im Nervensystem besonders reichlich vorkommt (LÜCKER u. BÜLTE 1997). Die
neuronenspezifische Enolase, die an der aeroben Glykolyse beteiligt ist und als γγ-Enolase im
ZNS und in neuroendokrinen Zellen zu finden ist (LÜCKER et al. 1998), ist als Enzym am
Stoffwechsel des ZNS beteiligt. Zu den Strukturproteinen gehören (a) die Gruppe der
Intermediärfilamente in den Axonen, zu denen das GFAP, Vimentin, sowie Neurofilamente
gehören (FUCHS u. CLEVELAND 1998), (b) das basische Myelinprotein, das Bestandteil
des Myelins ist (LÜCKER et al. 2002a), (c) das Tau-Protein (AUPPERLE et al. 2002), das an
die Mikrotubuli bindet sowie (d) das S100- und S100L-Protein (AUPPERLE et al. 2002). Bei
den Zwischenprodukten der spezifischen Genexpression wird zur Zeit die mRNA der ZNSspezifischen
Proteine GFAP (LANGE et al. 2002; SEYBOLDT et al., 2003) und basischen
Myelinproteins (LANGE et al. 2002) genutzt.
2.4.1 Nachweis ZNS-spezifischer Fettsäuren und Cholesterin
2.4.1.1 Gaschromatographisch-massenspektrometrische Methode (GC-MS)
Bei dieser Methode werden gehirnspezifische Fettsäureprofile mittels der
Gaschromatographisch-massenspektrometrischen Methode (GC-MS) identifiziert
(NIEDERER u. BOLLHALDER 2001). Nach Extraktion der Gesamtlipide und Aufreinigung
durch Festphasenextraktion, findet eine säurekatalysierte Umesterung zu
Fettsäuremethylestern (FAME) sowie Trennung, Identifizierung und Quantifizierung mittels
GC-MS statt. Durch die charakteristischen Verhältnisse der cis- und trans-Isomeren der
Nervonsäure können die Tierarten Rind, Schaf und Schwein voneinander unterschieden
werden. In Referenzwürsten mit unbekanntem Nervengewebe ist die Tierartenunterscheidung
bis zu einem ZNS-Gewebe-Anteil von 0,05 % möglich. Ohne Tierartenunterscheidung liegt
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