Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Diskussion
Kapitel 4.2.1.2). Die Untersuchungen zur Hitzestabilität der bovinen GFAP-mRNA in einem
Fleischerzeugnis, das bei 100°C Wasserbadtemperatur hergestellt und bei dem eine maximale
Kerntemperatur von 91°C für mindestens 20 Minuten erreicht wurde, haben gezeigt, dass der
Nachweis der GFAP-mRNA in allen 75 mit Rindergehirn dotierten Proben bei allen
Konzentrationsstufen möglich war (s. Kapitel 4.2.1.3).
Das Auftreten von falsch negativen Ergebnissen bei den stark erhitzten Brühwürsten mit 95°C
Brühtemperatur ist im Gegensatz zu Brühwürsten, die bei 100°C gegart wurden,
möglicherweise mit der unterschiedlichen Rezeptur der hergestellten Bräte erklären.
Brühwürste bis 95°C Brühtemperatur wurden mit Phosphat hergestellt. Die bei 100°C
gegarten Brühwürste wurden ohne Phosphat, aber unter Zusatz von Milchpulver hergestellt (s.
Kapitel 3.2.5.1). Somit ist denkbar, dass die Verwendung von Milcheiweiß, welches bei
hohen Temperaturen die Proteinkonfigurationen festigt, möglicherweise auch eine schützende
Wirkung auf die Stabilität der GFAP-mRNA in den bei 100°C Wassertemperatur erhitzten
Brühwürsten hatte.
Die Ergebnisse zeigen, dass hier mRNA weit über den bisher in der Literatur angegebenen
Zeitraum von bis zu 96 Stunden (HARRISON et al. 1995; MARCHUK et al. 1998;
FITZPATRICK et al. 2001; YASOJIMA et al. 2001) mittels RT-PCR nachweisbar war. Die
oben bereits diskutierten Ursachen für die Stabilität der GFAP-mRNA in verschiedenen
Geweben von Schwein und Schaf gegenüber hoher Temperatureinwirkung können auch beim
Nachweis der bovinen GFAP-mRNA in Fleischerzeugnissen eine Ursache für die hohe
postmortale Stabilität sein.
5.3.2 Leberwurst mit bovinem ZNS-Gewebe
Um den Einfluss von Fett und Enzymen aus Geweben, wie z.B. der Leber, auf den Nachweis
der GFAP-mRNA in Fleischerzeugnissen zu untersuchen, wurden Leberwürste hergestellt,
die in den Konzentrationsstufen 0 %, 0,25 %, 0,5 %, 1 % und 5 % mit bovinem
Gehirngewebe dotiert waren. Von insgesamt 64 beprobten mit bovinem Gehirngewebe
dotierten Leberwürsten waren zwei falsch negative Ergebnisse in der Konzentrationsstufe
0,25 % aufgetreten. Auch in dieser Versuchsreihe konnte die GFAP-mRNA über einen
Zeitraum von 35 bzw. 28 Tagen nachgewiesen werden (s. Kapitel 4.2.1.4).
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