Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Ergebnisse
Nach der Aufreinigung der Amplifikationsprodukte (s. Kapitel 3.2.3.4), wurden diese der
Sequenzanalyse zugeführt. Die Sequenzierung wurde durch das Institut für Tierzucht und
Vererbungslehre der Tierärztlichen Hochschule Hannover mittels des
Didesoxynukleotidverfahren nach SANGER et al. (1977) durchgeführt. Die verwendeten
PCR-Produkte stammten aus der RT-PCR mit Gehirngewebe der Tierarten Rind, Schaf,
Pferd, Damwild, Rehwild, Rotwild, Schwein, Wildschwein, Huhn und Pute (s. Kapitel
3.1.1.1). Anhand der durch die Sequenzierung erlangten Informationen der porcinen GFAPmRNA
(GenBank accession no. AJ551395) konnte für die Tierart Schwein / Wildschwein die
PCR mit den Primern GFAPpork1 und GFAPpork2 entwickelt werden (Abbildung 7).
Die Sequenzen der einzelnen Tierarten wurden bei der EMBL Nucleotide Sequence Database
hinterlegt:
Schwein/Wildschwein (Sus scrofa): Accession No. AJ551395
Schaf (Ovis aries): Accession No. AJ551397
Pferd (Equus caballus): Accession No. AJ551396
Damwild (Dama Dama): Accession No. AJ551398
Rehwild (Capreolus capreolus): Accession No. AJ551399
Rotwild (Cervus elaphus): Accession No. AJ551400.
Da die Primer nicht Bestandteil der Sequenz der jeweiligen Tierart sind, haben die bei der
EMBL Nucleotide Sequence Database hinterlegten Sequenzen eine Größe von 355 bp.
In Abbildung 8 sind die 168 bp großen Ausschnitte der einzelnen 399 bp großen Sequenzen
der oben genannten Tierarten vergleichend dargestellt.
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