Spezies- und gewebespezifischer Nachweis von bovinem ZNS ...

Material und Methoden
Tabelle 13: Dotierung der Leberwurstmasse mit Rindergehirngewebe
Konzentration
im
Fleischerzeugnis
Einwaage an
Leberwurstmasse
Einwaage an
Rindergehirnhomogenat
0 % 300 g 0 g
0, 25 % 299,25 g 0,75 g
0,5 % 298,5 g 1,5 g
1 % 297 g 3 g
5 % 285 g 15 g
Die Moulinette wurde nach der Herstellung jeder Konzentrationsstufe gründlich mit Wasser
und Seifenlauge gereinigt. Die Leberwurstmasse jeweils in Walsroder Kunstdarm gefüllt und
die einzelnen Konzentrationsstufen mit verschiedenfarbigen Wurstbändern gekennzeichnet.
Die Würste wurden anschließend in feste Plastikbeutel vakuum-eingeschweißt, um eine
mögliche Kontamination des Kochkessels mit bovinen Gehirngewebe durch austretende
Wurstmasse zu verhindern. Danach wurden die Würste im Kochkessel mit 80°C
Wassertemperatur für 85 Minuten gegart. Dabei fand in den ersten 15 Minuten die
Temperaturangleichung der Würste an das Wasserbad statt, während der eigentliche
Garvorgang 70 Minuten dauerte. Daraufhin wurden die Würste in ein mit kaltem Wasser
gefülltes Wasserbecken verbracht und während des Auskühlungsvorganges durchgeknetet,
um möglichen Fettabsatz zu vermeiden. Nachdem die Würste abgekühlt waren, wurden sie
über Nacht in ein Kühlhaus verbracht. Am nächsten Tag wurden die Würste für die RNA-
Extraktion beprobt. Die weitere Beprobung fand im wöchentlichen Abstand für den Zeitraum
von 28 Tagen statt. Auch diese Versuchsreihe wurde insgesamt dreimal durchgeführt.
3.2.5.4 Einfluss von Gewebe des peripheren Nervensystem (PNS) auf den Nachweis
boviner GFAP-mRNA in einem Brühwursterzeugnis
Bei diesem Versuch wurde Brät für pasteurisierte Brühwursterzeugnisse (Kapitel 3.2.1.1.1)
wie folgt mit bovinem peripheren Nervengewebe (Kapitel 3.1.1.2) vermengt (Tabelle 14):
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