Raíces y Tubérculos Andinos - Monitoreo y Evaluación de Impacto

si la presencia de infección viral era importante en loscampos de melloco de los agricultores de Las Huaconas;segundo, erradicación de virus en materiales promisoriosy de mayor aceptabilidad de melloco; tercero, determinarlos índices de recontaminación de clones de mellocolibres de virus, y, cuarto, proveer la distribución de semillade melloco de alta calidad fitosanitaria para uso en elárea de influencia de Las Huaconas.A continuación se resumen las experiencias de esta líneade acción; se incluyen los logros y los problemas que seencontraron en el proceso.Esquema empleado para la obtención decultivares de melloco libre de virusRecolección de muestras en campo de agricultoresy determinación de la incidencia viral. En unaprimera instancia, era necesario conocer la incidenciade los virus en los campos de los agricultores queproducen melloco. Con este fin, se realizó un muestreoen las diferentes comunidades de Las Huaconas, paradeterminar la presencia o la ausencia de virus en loscultivares locales que manejan los agricultores. Seprocedió a la recolección del material en diferentesparroquias correspondientes al cantón Colta, de laprovincia de Chimborazo, donde se encuentran ubicadaslas comunidades de Las Huaconas. Las ocho localidadesmuestreadas fueron Santa Rosa de Culluctús, SanFrancisco, San Bartolo de Rayoloma, Guangopud, TepecGatazo, Lirio, Huacona La Merced y Huacona San José.Se empleó la prueba serológica de ELISA para ladetección de virus en las muestras. Más detalle sobre lametodología de colecta y la evaluación mediante latécnica ELISA se ha incluido en el recuadro adjunto.La prueba ELISA correspondiente a materialesprovenientes de 19 agricultores de las diferentescomunidades de Las Huaconas indicaron que el mayorporcentaje de incidencia viral (88 %) correspondió a lacomunidad Sta. Rosa de Culluctús, seguido por lacomunidad Guangopud y La Merced, con un 50 % y un47 % de incidencia, respectivamente. Contrariamente,las comunidades Lirio y Huacona San José, dondesiembran variedad Puca y melloco caramelo, no presentavirus. Los lotes con mayor incidencia de viruscorrespondieron a la comunidad Huacona La Merced,con un 100% de infección para el virus PLRV. Se observa,además, que todos los lotes de esta localidad presentanla infección de hasta cuatro virus, que corresponden aPapMV-U, APLV-U, PLRV y TMV-U en porcentajes quevan del 6 % al 100 % de infección. Estos resultadoscorroboran lo reportado por Toledo y Jayasinghe, citadospor Duque (1994), quienes encontraron un 80% deinfección viral y la presencia de más de un virus encondiciones de campo.En lo referente a incidencia viral, en las comunidadesde Las Huaconas, el virus PLRV fue el de mayor incidencia,con un 84 %, seguido por APLV-U, con un 68 %; TMV-U,con un 63 %, y PapMV-U, con 53 %. Los virus que presentaronmenor incidencia fueron UVC, con 11 %, y AVA,con 5 %. Con relación a los virus de mayor distribuciónen los campos de melloco de los agricultores de LasHuaconas, son el PapMV-U, el APLV y el PLRV, presentesen seis localidades de las ocho muestreadas, al contrariodel virus AVA, presente sólo en Santa Rosa de Culluctús,aunque con una mínima incidencia (17 %) (Ver Figura3.1 y 3.2).Recolección de muestras en campo de agricultores y pruebas DAS-ELISALa toma de muestras fue al azar y en función de lasuperficie sembrada (45 muestras/ha aprox.). Elmuestreo consistió en tomar una hoja de la partebasal, la media y la otra apical de una planta. Estasmuestras fueron colocadas a –20 °C en el laboratoriopara su posterior evaluación serológica, mediantela técnica DAS-ELISA (Enzyme Link ImmunosorbentAssay). Se probaron ocho virus para cada muestracolectada en cada localidad.La prueba serológica de ELISA es una técnica degran sensibilidad, producida por la reacción in vitroentre antígeno: virus; y el anticuerpo: imunoglobulinaespecífica para el virus por identificar enplantas. Esta técnica se basó en protocolosproporcionados por el Centro Internacional de laPapa (CIP)-Lima, así como también en ladisponibilidad de los antisueros.La técnica serológica fue utilizada para los siguientesvirus en melloco: UMV, potyvirus del mosaico delulluco; UVC, comovirus C del ulluco; TMV,tobamovirus del mosaico del tabaco; PAPMV-U,potexvirus del mosaico de la papaya variante ulluco;APLV-U, tymovirus andino latente de la papa varianteulluco; PRLV, luteovirus del enrollamiento de la papa;PVT, trichovirus T de la papa, y AVA, nepovirus A de laarracacha.Producción Agroecológica y Limpieza de Virus de Melloco83