Rapporto finale - Metodologie di Monitoraggio dell ... - Momar

La ricerca si è concentrata sul mitilo mediterraneo (Mytilus galloprovincialis) in
quanto ampiamente riconosciuto come sentinella ambientale, sul quale il
progetto MOMAR ha previsto di far convergere anche lo studio del
bioaccumulo di alcuni metalli pesanti.
Mitili provenienti da un allevamento presso l’Isola Palmaria (all’estremità
occidentale del Golfo di La Spezia) sono stati traslocati per circa 4 settimane
nelle stazioni oggetto dell’indagine, localizzate nell’area marina costiera
antistante la città di Livorno ed all’interno del porto. I mitili erano contenuti in
reticelle in plastica di maglia pari a 2 cm, poste ad una profondità di circa 2 m,
non direttamente in contatto con il fondale. La dimensione dei mitili era
compresa nel range 50-70 mm.
Al termine del periodo di esposizione, i mitili sono stati prelevati e portati in
laboratorio avvolti in un panno umido, all’interno di un contenitore
termostatico alla temperatura di 18 ± 2° C. In queste condizioni sono stati
mantenuti overnight in attesa di essere utilizzati per l’analisi dei biomarker. Per
ciascun individuo è stato determinato il peso umido della conchiglia e delle
parti molli al fine di determinare l’indice di condizione (CI), espresso come
(peso delle parti molli/ peso della conchiglia)*100.
Tipi cellulari oggetto dell’indagine
Gli emociti sono stati selezionati come tipo cellulare su cui analizzare i tre
biomarker oggetto dell’indagine, avendo il vantaggio di essere cellule
facilmente isolabili dal muscolo adduttore del mitilo da cui sono stati prelevati
tramite una siringa ipodermica da 5 ml. Durante ogni campionamento sono
stati prelevati trenta mitili da ciascuna stazione; da questi sono stati ricavati 6
pool, ciascuno ottenuto cumulando l’emolinfa di 5 individui.
Limitatamente ad una stazione (Porto Mediceo) l’indagine è stata estesa ad un
secondo tipo cellulare, le cellule branchiali, che rappresentano un’importante
interfaccia tra l’organismo e l’ambiente. Inoltre, è stata anche valutata l’entità
della risposta sia nei mitili traslocati che in quelli della popolazione “naturale”,
che si rinviene sulle parti sommerse di banchine e pontili galleggianti. Per
ottenere la sospensione di cellule branchiali da destinare ai test di genotossicità
sono state seguite le procedure descritte da Nigro et al., 2006.
Stazioni indagate
La localizzazione delle stazioni oggetto dell’indagine è descritta nella Fig. 1; le
caratteristiche delle singole stazioni sono brevemente descritte di seguito.
0 - Isola Palmaria (La Spezia). Questo è il sito scelto per il prelievo dei mitili
destinati agli esperimenti di traslocazione nelle stazioni oggetto dell’indagine
ed è stata considerata come controllo, in quanto relativamente distante
dall’area portuale di La Spezia.
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