Rapporto finale - Metodologie di Monitoraggio dell ... - Momar

modo è stato possibile orientare la scelta dei materiali, evitando il rischio di
confondere gli eventuali effetti di questi ultimi con le possibili differenze
dovute alle due metodologie d’esecuzione del saggio (laboratorio e situ).
Scelta della sonda biologica
Sono state effettuate 4 prove preliminari in situ, in 4 differenti date, con
l’obiettivo di progettare la sonda biologica che superasse tutte le criticità
emerse durante l’esposizione in mare. Durante la durata dell’intera fase
preliminare sono state testate 3 tipologie di camere test per valutare le
eventuali differenze nell’esposizione degli embrioni ai contaminanti
ambientali. La prima tipologia di camera è dotata di una sola apertura, del
diametro di 2,5 cm, in corrispondenza dell’estremità superiore. La seconda
tipologia presenta, oltre alla precedente “finestra”, una seconda apertura in
corrispondenza della superficie laterale del cilindro delle dimensioni di 1,5 x 4
cm. Infine la terza tipologia di camera prevede 2 finestre laterali di 1,5 x 4 cm e
una terza apertura in corrispondenza dell’estremità superiore. Tutte le aperture
sono state rivestite con una rete da plancton con maglia di 85 μm. Tale misura
impedisce la fuoriuscita delle uova fecondate e massimizza il ricambio d’acqua
all’interno della camera. Tutte le reti sono incollate con colla specifica per tubi e
raccordi in PVC rigido (Tangit), applicata esclusivamente sulla superficie
esterna delle camere. Come detto inizialmente, le camere sono fissate a un
supporto rigido in PVC, del diametro di 10 cm per 2 cm di altezza. Nelle ultime
2 date (29.11.2010 e 13.12.2010) sono state inoltre testate anche reti con maglie
di 55 μm, al fine di trovare il giusto compromesso tra ricambio d’acqua e
quantità di particolato all’interno delle camere. Tutte le sonde sono state fissate
alla riva e dotate di peso di 300 g, che dopo le prime prove si è dimostrato il
peso più idoneo.
Prove a diverse temperature
Le procedure standard per il test di embriotossicità (ASTM 2004; ICES 1997;
USEPA 1994, 1995, 2000) condotto in laboratorio prevedono una temperatura di
18°C±1. Nel Mar Ligure questa temperatura si raggiunge solamente in un
ristretto periodo alla fine della primavera e agli inizi dell’autunno (ai limiti del
periodo estivo). Appare quindi fondamentale, al fine di una confrontabilità con
le prove in situ, valutare l’applicabilità della metodologia anche a diverse
temperature, sia più basse, come avviene nel periodo invernale, sia più alte al
fine di valutare l’applicabilità delle prove nel periodo estivo. E’ noto l’effetto
ritardante delle basse temperature sullo sviluppo embrionale dei ricci di mare
(Beiras et al., 2001). Al fine di meglio calibrare le prove di campo sono state
quindi eseguite alcune prove di laboratorio a temperature differenti. In
particolare gli embrioni di P. lividus sono stati esposti secondo il saggio di
embriotossicità, alle temperature di 13, 18 e 24°C. Come variabile di risposta è
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