Rapporto finale - Metodologie di Monitoraggio dell ... - Momar

3) preparazione del KS per l’eliminazione dell'acido oleico dagli estratti da SPMD
Gli estratti degli SPMD devono essere purificati su KS [Silice con Silicato di
potassio](Lebo et al. 1989) per eliminare l'acido oleico residuo. Sono stati pesati
18 gr di silice 70/230 °C prelavata con CH2Cl2 e attivata a130°C per 12h. Dieci
grammi di KOH sono stati solubilizzati in 45 ml di CH3OH per pesticidi. In un
pallone da 100 ml si è aggiunta la silice a piccole porzioni e si è lasciato reagire
sotto agitazione a 55°C per 90 minuti. Il metanolo è stato allontanato sotto
leggero vuoto portando la temperatura del bagno gradualmente a 90°C. La fase
è stata attivata in stufa a 130° per una notte. Gli estratti sono stati eluiti con
miscela esano/cloruro di metilene al 10%.
4) preparazione del gel di silice impregnato di acido fosforico
Cinquanta grammi di gel di silice sono stati trattati con 33 gr di acido
ortofosforico al 85% prelavato con CH2Cl2 (Petty et al. 2004). La miscela è stata
mescolata fin a quando non è diventata fluida.
5) purificazione dei dializzati SPMD per IPA dopo GPC
E' stata preparata una colonna cromatografica da 10 mm introducendo
nell'ordine un fiocco di lana di vetro prelavato con cloruro di metilene, un cm 3
di solfato di sodio prelavato con cloruro di metilene, tre grammi di gel di silice
attivata, tre grammi di silicato di potassio, tre grammi di silice impregnata con
acido ortofosforico, due centimetri di sodio solfato anidro. La colonna è stata
condizionata con miscela esano/t-butilmetiletere al 4%. Dopo deposizione il
campione è stato eluito con 50 ml di miscela esano/t-butilmetiletere al 4%.
Ciascun campione dopo aggiunta di 100 μl contenenti gli standard di recupero
è stato concentrato a 50 μl sotto leggero flusso di azoto ed analizzato in GC/MS
(Petty et al. 2000).
6) purificazione dei dializzati SPMD per PCB dopo GPC
E' stata preparata (Petty et al. 2000) una colonna cromatografica da 10 mm
introducendo nell'ordine un fiocco di lana di vetro prelavato con cloruro di
metilene, un cm 3 di solfato di sodio prelavato con cloruro di metilene, cinque
grammi di Florisil 60–100 mesh trattato a 475°C per 8 h e attivato a 130°C per
una notte prima dell'uso (Booij et al. 2002). La colonna è stata condizionata con
miscela esano/metil-t-butiletere 1/3 ed i campioni eluiti con 60 ml della
miscela. Dopo concentrazione gli estratti sono stati ulteriormente purificati su
una colonna da 10 mm preparata introducendo nell'ordine un fiocco di lana di
vetro prelavato con cloruro di metilene, un cm 3 di solfato di sodio prelavato con
cloruro di metilene, cinque grammi di silice attivata. Dopo condizionamento
con esano e deposizione del campione si eluito con 46 mL di esano e con 55 ml
di una miscela al 40% di metil-t-butiletere in esano. Ciascun campione dopo
aggiunta di 100 μl contenenti gli standard di recupero è stato concentrato a 50
μl sotto leggero flusso di azoto ed analizzato in GC/MS.
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