Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 94
Zufütterung bei 35,35 Stunden deutlich. Xanthin wurde als zellulärer Streßmarker
nach Aufhebung der akuten Hungersituation wieder in die Zellen eingeschleust, um
die zuvor abgebaute rRNA zu regenerieren.
Glucose [g/l]
16
14
12
10
8
6
4
2
0
-2
Glucose
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Kultivierungsdauer [h]
Xanthin
Abb. 39: Extrazelluläre Xanthin- und Glucose-Konzentration während einer E.coli-Fermentation
(Ergebnisse der HPLC-Glucose-Analytik wurden von M. Schmidt Abt. Mikrobielle Systeme,
GBF Braunschweig zur Verfügung gestellt)
Die in Abbildung 39 für Xanthin dargestellte Kurve zeigte gute Übereinstimmungen
mit Konzentrationsverläufen, die in der Literatur für die Nukleobase Uracil während
Hochzelldichte-Kultivierungen von E. coli gefunden wurden (Rinas et al., 1995). Auch
hier wurde ein Anstieg der extrazellulären Uracil-Konzentration in Verbindung mit
einer Glucose-Limitierung festgestellt. Es wurde neben dem Uracil auch eine Akku-
mulation des Xanthins beobachtet, die jedoch nicht exakt quantifiziert wurde, sich
aber während des Fermentationsverlaufs über einen Bereich von 1 bis max. 50 mg/l
erstreckte (Rinas, 1998), was durch die im Rahmen der vorliegenden Arbeit
ermittelten Ergebnisse nochmals bestätigt wurde. Aufgrund der Tatsache, daß zu
diesem Zeitpunkt keine HPLC-Referenz-Analytik durchgeführt werden konnte, ließ
sich die Qualität der Biosensor-Resultate nicht weiter beurteilen. Da die Intention
dieser Anwendung jedoch in der Hauptsache in der Aufklärung des Konzentrationsverlaufes
und nicht in der Bestimmung absoluter Werte lag, hat sich das entwickelte
System als sehr gut geeignet erwiesen, um Xanthin in komplexen Realproben
detektieren zu können.
50
40
30
20
10
0
Xanthin [mg/l]