Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 103
Vergleich zur nominellen (Kapillardurchmesser) Schichtdicke nochmals. Für eine
querdurchstrahlte Kapillare kann die effektive Weglänge nach folgender Gleichung
abgeschätzt werden:
d = (π ⋅ Kapillardurchmesser)/4 (15)
Für die verwendeten Kapillaren mit einem Innendurchmesser von 50 µm würde damit
eine effektive Schichtdicke von nur 39 µm resultieren. Aufgrund dieses verkürzten
Weges werden bei einer UV-Detektion in der CE Sensitivitäten erreicht, die
verglichen mit der HPLC um das 30- bis 100-fache geringer sind (Engelhardt, 1991).
3.3.1.1 UV-Detektion von Xanthin
Abbildung 46 zeigt ein im Wellenlängenbereich von 200 bis 400 nm aufge-
nommenes UV-Spektrum einer 200 µM Xanthin-Lössung:
Absorption
Wellenlänge [nm]
Abb. 46: UV-Spektum von Xanthin, 200 µM Xanthin in 50 mM Borat-Puffer pH 8
Das Spektrum zeigte mit 210, 254 und 280 nm drei lokale Absorptionsmaxima. Diese
drei gefunden Wellenlängen standen in sehr guter Übereinstimmung mit den in
verschiedenen Veröffentlichungen zur Xanthin-UV-Detektion gewählten Wellenlängen
(214 nm: Korman et al., 1994; 254 nm: Bory et al., 1996; 280 nm: Shihabi et
al., 1995). Die folgenden Untersuchungen wurden daher bei einer Detektionswellen-
länge von 280 nm durchgeführt.