Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...
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3. Ergebnisse 60<br />
Menge immobilisierter GOD zu sättigen, daher hatte <strong>der</strong> Glucose-Entzug durch die<br />
Hexok<strong>in</strong>ase-Reaktion weniger E<strong>in</strong>fluß auf das Grundsignal.<br />
Stromabnahme [nA]<br />
3,5<br />
3,0<br />
2,5<br />
2,0<br />
1,5<br />
1,0<br />
0,5<br />
0,0<br />
Elektrode 1<br />
Elektrode 2<br />
Elektrode 3<br />
Elektrode 4<br />
Elektrode 5<br />
0 10 20 30 40 50 60 70<br />
ATP-Konzentration [µM]<br />
Abb 19b: E<strong>in</strong>fluß des HK/GOD-Aktivitätsverhältnisses beim Nachweis ger<strong>in</strong>ger ATP-Konzentrationen<br />
Elektrode 5, die mit <strong>der</strong> größten GOD-Aktivität immobilisiert wurde, zeigte im Vergleich<br />
zu allen an<strong>der</strong>en Sensoren e<strong>in</strong>en abweichenden Kurvenverlauf. Aufgrund des<br />
GOD-Überschusses wurde e<strong>in</strong> sehr hohes Grundsignal erzeugt, das durch die<br />
Injektion von schwach konzentrierten ATP-Proben (7,8/15,63 µM) ke<strong>in</strong>e Bee<strong>in</strong>-<br />
flussung erfuhr. Erst bei e<strong>in</strong>er ATP-Konzentration von 31,25 µM wurde <strong>der</strong> GOD-<br />
Reaktion genug Glucose entzogen, um das amperometrische H2O2-Signal zu ver-<br />
r<strong>in</strong>gern und wies bei <strong>der</strong> Messung <strong>der</strong> weiteren ATP-Standards im Gegensatz zu den<br />
Elektroden 1 bis 4 ke<strong>in</strong>en hyperbolischen son<strong>der</strong>n e<strong>in</strong>en l<strong>in</strong>earen Verlauf auf.<br />
Die l<strong>in</strong>earen Bereiche, Sensitivitäten und berechneten Nachweisgrenzen (S/N=3) für<br />
die e<strong>in</strong>zelnen Biosensoren s<strong>in</strong>d <strong>in</strong> Tabelle 11 zusammengefaßt.<br />
Elektrode l<strong>in</strong>earer Meßbereich Sensitivität Detektionslimit<br />
1 0 µM bis 62,5 µM 0,015 nA/µM 11,8 µM<br />
2 0 µM - 62,5 µM 0,028 nA/µM 11,1 µM<br />
3 7,8 µM – 125 µM 0,037 nA/µM 9 µM<br />
4 7,8 µM – 125 µM 0,051 nA/µM 8,1 µM<br />
5 12,1 µM – 1000 µM 0,009 nA/µM 28,6 µM<br />
Tab. 11: L<strong>in</strong>eare Meßbereiche, Sensitivitäten und Nachweisgrenzen <strong>der</strong> entwickelten ATP-Sensoren