Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 79
Potential
[mV]
H2O2-Signal Xanthin-Signal Xanthin/Fe(CN)6 3-
Signal
600 17,2 µA 1,5 µA 1,74 µA
500 17,6 µA 0,3 µA 0,55 µA
400 15 µA 30 nA 0,17 µA
300 12 µA 4 nA 6 nA
4-
Tab. 16: Potentialeinfluß auf H2O2-, Xanthin- und Fe(CN)6 -Oxidation an einer Graphitelektrode
Auch an diesem Elektrodenmaterial wurde Xanthin bei einem angelegten Potential
von 600 mV effektiv oxidiert. Das Signal betrug im Vergleich zur reinen H2O2-
Oxidation 11,5%. Im Unterschied zu Platin lief der Elektronentransfer an Graphit
bereits bei 400 mV so langsam ab, daß der resultierende Strom vernachlässigbar
klein blieb. Bei diesem Potential war die Empfindlichkeit der H2O2-Detektion lediglich
um 13% gegenüber einer Messung bei 600 mV herabgesetzt. Durch den Zusatz von
Kaliumhexacyanoferrat zum Carrier-Puffer kam es wiederum zu einem Elektronen-
transfer zwischen dem Mediator und Xanthin und zu einer anschließenden Re-
Oxidation des gebildeten Fe(CN)6 4- an der Graphitoberfläche. Aufgrund des ge-
ringeren Standardpotentials des Mediators (s. S. 71) führte die Oxidation von
Fe(CN)6 4- auch bei 400 mV noch zu einem deutlich meßbarem Signal, das bei einem
Potential von 300 mV jedoch auf 6 nA abnahm und damit nicht länger relevant war.
Im Anschluß an diese Untersuchungen wurde die Elektrode elektrochemisch in einer
Fe(CN)6 3- -Lösung aktiviert und über das EDC-Verfahren eine BSA-Membran (5 µl,
100 mg/ml) aufgebracht (Kap. 2.2.3.3). Die aus der Injektion einer 1mM H2O2- bzw.
Xanthin-Lösung resultierenden Ströme, die an der aktivierten bzw. beschichteten
Graphitelektrode detektiert wurden, sind in Abbildung 30 dargestellt. Die prozentualen
Angaben beziehen sich jeweils auf die bei den entsprechenden Potentialen in
Tabelle 16 angegebenen Werte.
In einem Potentialbereich von 300 bis 500 mV waren die an der unbehandelten
(Tab. 16) bzw. aktivierten Graphitelektrode detektierten H2O2-Signale Balken nahezu
identisch (Abb. 30, rote Balken ≈ 100%), so daß die Aktivierung ohne Auswirkung auf
den resultierenden Stromfluß blieb, der in diesem Bereich allein durch die Diffusion
bestimmt wurde.