Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 71
Strom [µA]
14 0,1 mM Xanthin
12
10
8
6
4
2
0
-2
-4
0,1 mM Xanthin + 0,5 mM Fe(CN) 6
0 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100
3-
Potential [mV]
3-
Abb. 26: CV für Xanthin und Xanthin/Fe(CN)6 , Durchlaufgeschwindigkeit: 50 mV/s
Auch in diesem Fall zeigte sich, daß der Mediator-Zusatz im Vergleich zur reinen
Xanthin-Lösung zu höheren Stromstärken führte. Im Gegensatz zu den Messungen
im FIA-System wurde mit Hilfe der cyclischen Voltametrie auch bei einem Potential
von +600 mV ein deutlicher Stromstärken-Unterschied zwischen Xanthin- und
Xanthin/Mediator-Oxidation beobachtet. Allgemein ließen sich die höheren Signale
damit erklären, daß aufgrund des Standardpotentials von -250 mV vs Pt, (Hamann
und Vielstich, 1998; Stiene, 1997) für die Fe(CN)6 4- -Oxidation eine deutlich ge-
ringere Überspannung benötigt wurde und somit der Elektronentransfer zwischen
Mediator und Elektrode im Vergleich zur Xanthin-Direktoxidation auch bei geringeren
Potentialen beschleunigt ablief.
3.2.1.2 Einfluß einer BSA-Membran auf das unspezifische Signal
Um die elektrochemische Eigenoxidation von Xanthin bei höheren Potentialen zu
vermeiden, und um eine möglichst große Empfindlichkeit der Wasserstoffperoxid-
Umsetzung ausnutzen zu können, wurde die Arbeitselektrode mit einer Matrix bestehend
aus 25 mg UV-polymerisierbarer Paste und 10 µl BSA-Lösung (100 mg/ml)
als Diffusionsbarriere beschichtet. Mit diesem Detektor wurden die unter 3.2.1.1
durchgeführten Messungen wiederholt, die resultierenden H2O2-, Xanthin- bzw.
Xanthin/Fe(CN)6 3- -Signale sind in Abb. 27 graphisch dargestellt. Die prozentualen