Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 112
Punkt x vorliegenden Konzentrationen c aller Substanzen i mit der Ladung z und
Mobilität µ entlang des Migrationsweges durchgeführt. Die Kohlrausch-Funktion ω
muß an jedem Punkt dieser Strecke einen identischen Wert aufweisen.
Bei einer indirekten Detektion kann daher durch die Injektion einer Probe mit einer
vom Elektrolyten abweichenden Leitfähigkeit ein Signal verursacht werden. Die an
der Schnittstelle der beiden Zonen stattfindende Aufkonzentrierung oder Verdünnung
der Probe stellt eine stationäre Phase dar, da sie keine elektrophoretische Mobilität
aufweist. Der Transport der Zone zum Detektor erfolgt ausschließlich über den
elektroosmotischen Fluß, daher wird dieser in der Regel aus den Migrationszeiten
der entsprechenden Signale bestimmt (Macka et al., 1997). Da der Entstehung
dieses Peaks keine Verdrängung des fluoreszierenden Pufferions durch den
Analyten zu Grunde liegt, handelt es sich um einen Systempeak. Weitere analyt-unspezifische
Signale entstehen nach einem von Macka et al. (1997) publizierten
Modell ebenfalls aufgrund von Mobilitätsunterschieden zwischen Puffer- und Probenionen.
Voraussetzung für die Anwendbarkeit des Modells und damit für Ausbildung
eines Systempeaks ist ein Drei-Ionen-System, das neben dem Fluorophor und
seinem Gegenion noch mindestens ein weiteres Pufferion aufweist. Das Prinzip
dieser auch als vacancy peaks (Freistellenpeaks) bezeichneten Signale ist in den
Abbildungen 50 und 51 dargestellt:
a)
Anode Probe
Kathode
b)
c)
B 1
B 2
B1 B B Probe 2 1
B1 B2 B 1
B 1
B2
B 1
B 2
B 1
B Probe
1 B1 B2 B1 B2
B 2
B 1
Probe B2 B1 B2 Abb. 50: µB2 < µB1 < µP a: Ausgangssituation Abb. 51: µP < µB2 < µB3 a: Ausgangssituation
b: Anreicherung u. Ausbildung einer B1-Zone b: Anreicherung u. Ausbildung einer B2-Zone
c: Verbreiterung der Probenzone c: Verbreiterung der Probenzone
a)
Anode Probe
Kathode
b)
c)
B 1
B 2
B 1
B 2
B 1
B 2
B1 B Probe 2 B2 B1 B2 B 1
B 2