Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 85
Xanthin-
Konz.
XOD-
Signal
unbehandelte Elektrode silanisierte Elektrode
BSA-
Signal
Hintergrund
XOD-
Signal
BSA-
Signal
Hintergrund
50 µM 256 nA 128 nA 50 % 220 nA 80 nA 36%
100 µM 512 nA 288 nA 56% 440 nA 120 nA 27%
250 µM 1096 nA 640 nA 58% 820 nA 180 nA 22%
500 µM 1620 nA 1020 nA 63% 960 nA 200 nA 21%
Tab. 18: Einfluß der Silanisierung auf Höhe und Verhältnis von spezifischem und unspezifischem
Signal
Diese Gelschicht stellte eine Diffusionsbarriere mit geringer Schichtdicke dar, die
aber dennoch einen unterschiedlichen Einfluß auf die Xanthin- bzw. H2O2-Oxidation
ausübte. Aufgrund seiner Größe wurde Xanthin effektiver abgeschirmt als das
kleinere Wasserstoffperoxid, was sich mit ansteigender Analyt-Konzentration immer
stärker bemerkbar machte und so zu einer Erhöhung des spezifischen Signalanteils
führte. Das Ansprechverhalten des silanisierten Detektors ähnelte damit dem einer
gealterten mit einem Schmutzfilm überzogenen Elektrode. Die unbehandelte neue
Elektrode zeigte in Bezug auf die Xanthin-Konzentration ein reziprokes bereits zuvor
diskutiertes Verhalten.
Zusammenfassend erwies sich die über die Silanisierung der Platinelektrode
aufgebrachte (Si-O)n-Matrix als das am besten geeignete Verfahren zur Unter-
drückung der enzym-unabhängigen Xanthin-Signale, daher wurde zu Beginn jedes
Meßtages die zur amperometrischen Detektion verwendete Elektrode neu silanisiert.
3.2.3.2 Trägermaterial und Aktivierungsmethode
Als Immobilisierungsmatrix wurden in dieser Versuchsreihe CPGs verschiedener
Größe sowie nicht poröse Glas-Beads und Eupergit C eingesetzt. Aktiviert wurden
die Glasträger über die unter 2.2.3.1 bzw. 2.2.3.3 beschriebenen APTS- und GOPS-
Verfahren. Zur Kopplung auf Eupergit wurden dessen aktivierte Oberflächengruppen
ausgenutzt. Die jeweiligen Reaktoren wurden in das Fließsystem eingesetzt, zur
Bestimmung des unspezifischen Signalanteils wurde die Xanthin-Probe nach der
zweiten Injektion über einen Reaktor geleitet, der auf CPG (APTS-aktiviert, 700 Å)