Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 76
Menge noch aktiver XOD in der Paste verblieb. Da die Kristallstruktur der Xanthin-
Oxidase bis zum heutigen Zeitpunkt noch nicht aufgeklärt und damit die Ladungsverteilung
auf der Proteinoberfläche unbekannt ist, ließen sich keine Rückschlüsse
über mögliche die Enzymstabilität beeinflussende Wechselwirkungen geladener
Oberflächengruppen mit den verschiedenen Supplementen ziehen. Jedoch müssen
nicht ausschließlich solche direkten Wechselwirkungen zwischen XOD und einem
Zusatzstoff für eine Beeinflussung der Aktivität verantwortlich gewesen sein, sondern
denkbar wäre auch, daß einige dieser Stoffe das Enzym in der Paste besser vor der
denaturierenden UV-Strahlung abschirmten, so daß ein größerer Anteil an aktiver
XOD in der Membran verblieb. Aufgrund der Vielfältigkeit und Komplexität der
möglichen Wechselwirkungen sowie der unbekannten Proteinstruktur können die
beobachteten Effekte jedoch nur theoretisch diskutiert werden, auch weitere
Experimente führten zu keinem Aufschluß über die Art der Wechselwirkungen.
3.2.1.4 Einfluß von Pastenzusätzen auf die Signalhöhen
Neben dem Einfluß der Additive auf die Sensor-Stabilität wurden auch die
Auswirkungen dieser Substanzen auf die Höhe der Ausgangssignale untersucht
(Abb. 29).
Strom [nA]
140
120
100
80
60
40
20
0
kein
Zusatz
BSA
Lactitol
Polylysin
Lactitol/
Dextran
Lactitol/
Dextran/
BSA
Polylysin/
BSA
Abb. 29: Ausgangssignale der UV-XOD-Elektroden mit verschiedenen Pastenzusätzen
Der Zusatz von BSA, das bei pH 8 negativ geladen vorliegt (pI = 4,8, Yoshida et al.,