Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 128
voir 1) und -0,5 kV (Reservoir 3) an die beiden Seitenkanäle angelegt. Hierdurch
wurde verhindert, daß die Probe auch nach der Injektion noch in den Hauptkanal gelangen
und eine Bandenverbreiterung hervorrufen konnte. Eine weitere Erhöhung
der push-back-Spannung an Reservoir 2 führte zu einem verstärkten Eindringen des
CE-Puffers aus dem Haupt- in den Seitenkanal, so daß bei den darauffolgenden
Analysen die Injektionszeit verlängert werden mußte, um den doppel-T-Bereich
wieder mit einer repräsentativen Probenzusammensetzung zu füllen. Die Spannung
an Kanal 3 wurde bei -0,5 kV belassen, da ein stärkeres Zurückdrücken der Probe in
die zum Abfall-Reservoir führende Kapillare keine negativen Auswirkungen auf die
Gesamtanalysendauer hatte.
3.4.1.3 Injektionsdauer
Der elektrokinetische Modus erforderte eine Mindestinjektionszeit, in der
gewährleistet sein mußte, daß auch die Probenkomponente mit der langsamsten
Wanderungsgeschwindigkeit den doppel-T-Bereich erreicht hatte, wobei jedoch eine
Überladung vermieden werden sollte, da diese zu einer Verbreiterung der Analyt-
Bande führen kann.
In Abbildung 60 sind die Elektropherogramme dargestellt, die mit einer Injektions-
bzw. Separations-Spannung von 0,5 kV und 7 kV und vier verschiedenen
Injektionszeiten aufgenommen wurden. Die Migrationszeiten, Xanthin-Peakhöhen
sowie die Peakbreiten in halber Höhe sind in Tabelle 25 zusammengefaßt:
Injektionszeit [s] Migrationszeit [s] Peakhöhe [mAU] w1/2 [s]
5 9,14 753 1,26
15 10,06 1385 1,5
30 10,08 1124 1,6
Tab. 25: Einfluß der Injektionszeit auf die Peakdaten