Entwicklung alternativer Methoden zur Nukleotid- Analytik in der ...

3. Ergebnisse 62
Stromabnahme [nA]
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
-1
10 µM Glucose
50 µM Glucose
100 µM Glucose
500 µM Glucose
0 20 40 60 80 100 120 140
ATP-Konzentration [µM]
Abb. 20b: Einfluß der Glucosemenge auf das ATP-Signal im Konz.-Bereich von 0 – 125 µM ATP
Neben einer Glucose-Konzentration von 50 µM wurden Messungen mit einem Zusatz
von 10 µM, 100 µM und 500 µM des Kohlenhydrats zum Clark & Lubs-Puffer durch-
geführt. Bei der Herstellung der ATP-Standards wurden diese Konzentrationen jeweils
mit berücksichtigt. Mit dem Anheben der Glucose-Konzentration standen der
Hexokinase und Glucose-Oxidase größere Substratmengen zur Verfügung, so daß
beide Reaktionen mit einem erhöhten Umsatz abliefen und zu einer mit der Glucose-
Konzentration ansteigenden Differenz zwischen Grund- und ATP-Signal führten
(Abb. 20a/b). Aus Abbildung 21 wird deutlich, daß das Grundsignal des entwickelten
Biosensors linear auf die dem Carrier zugesetzten Glucose-Konzentrationen
reagierte. Bei Einsatz der verschiedenen Glucose-Carrier-Konzentrationen ver-
änderte sich der lineare Meßbereich, die Sensitivität und das berechnete Detektionslimit
der Bi-Enzymelektrode wie in Tabelle 12 angegeben:
Glucose-Konz. linearer Meßbereich Sensitivität Detektionslimit
10 µM 0 – 125 mM 2,7 pA/µM nb
50 µM 0 – 125 µM 51 pA/µM 8,1 µM
100 µM 15,5 – 250 µM 70 pA/µM 18,3 µM
500 µM 62,5 – 1000 µM 115 pA/µM 65,4 µM
Tab. 12: Einfluß der Glucose-Carrier-Konzentration auf den linearen Meßreich, die Sensitivität und
Nachweisgrenze der HK/GOD-Elektrode 4