Ce document numérisé est le fruit d'un long travail approuvé par le ...

) Etude en microscopie optique
L'étude en microscopie optique des cellules ciliées est un examen simple, rapide,
effectué en routine, permettant d'apprécier la richesse du prélèvement en cellules ciliées et
leur motilité. Il s'agit d'une appréciation globale s'adressant à l'ensemble du prélèvement.
• Observation simple des cellules
L'observation en microscopie optique est effectuée après une agitation vigoureuse de la
préparation afin de mettre en suspension les cellules ciliées, puis une goutte du milieu de
culture préalablement thennostatée à 37°C est déposée entre lame et lamelle.
Le premier examen est une étude de la viabilité des cellules ciliées à l'aide d'un
colorant vital, le bleu de Trypan, permettant de quantifier le pourcentage de cellules vivantes
(non colorées) et mortes (colorées en bleu).
L'examen direct en microscopie optique montre l'existence ou non de cellules ciliées,
l'existence ou non d'un battement ciliaire; il permet une étude qualitative du battement
ciliaire et une évaluation du pourcentage de cellules ciliées vivantes dont le battement
apparaît macroscopiquement normal. La fréquence, la coordination et l'amplitude du
battement ciliaire peuvent être appréciées de façon semi-quantitative par un examinateur
expérimenté.
L'examen en microscopie optique peut être complété, s'il apparaît anormal, par l'étude
de la fréquence du battement ciliaire en couplant au microscope un photomètre (étude
microphoto-oscillographique). Cette étude du battement ciliaire doit être effectuée sur un
fragment d'épithélium prélevé depuis moins de deux heures.
• Analyse histologique
La microscopie optique permet également, après fixation et coloration, de préciser le
type et la structure des différentes cellules présentes (cellules épithéliales, cellules
caliciformes, cellules basales, autres... ), la hauteur épithéliale, les glandes sous-muqueuses,
l'existence d'une métaplasie et d'une dégénérescence épithéliale... On peut effectuer
également des marquages immunohistochimiques.
III