Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...
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MATERIALI, METODI E STRUMENTAZIONE - 111<br />
In risposta a questo bombardamento si verificano una serie <strong>di</strong> fenomeni tra cui<br />
l’emissione <strong>di</strong> elettroni secondari, con energia <strong>di</strong> pochi eV, e <strong>di</strong> elettroni<br />
retro<strong>di</strong>ffusi, <strong>di</strong> alta energia, generati dall’interazione del fascio incidente con gli<br />
atomi del campione.<br />
Poiché l’intensità dell’emissione <strong>di</strong> elettroni retro<strong>di</strong>ffusi <strong>di</strong>pende, oltre che<br />
dall’angolo con cui il fascio colpisce <strong>la</strong> su<strong>per</strong>ficie del campione, anche dal numero<br />
atomico me<strong>di</strong>o del campione, variazioni locali del numero atomico, dovute al<strong>la</strong><br />
presenza <strong>di</strong> atomi pesanti, producono variazioni nel contrasto dell’immagine.<br />
Oltre a questi fenomeni l’interazione del fascio <strong>di</strong> elettroni incidente con il<br />
campione ha come ulteriore effetto quello <strong>di</strong> produrre raggi X primari, con<br />
lunghezze d’onda ed energie caratteristiche degli elementi presenti nel campione.<br />
Lo strumento SEM/EDAX raccoglie lo spettro del<strong>la</strong> ra<strong>di</strong>azione X emessa dal<br />
cristallo e lo utilizza <strong>per</strong> identificare gli atomi presenti.<br />
Dal<strong>la</strong> lettura dello spettro, poiché l’ampiezza <strong>di</strong> ogni picco è <strong>di</strong>rettamente<br />
proporzionale al<strong>la</strong> quantità <strong>di</strong> fotoni emessa da un partico<strong>la</strong>re elemento, è<br />
possibile fare una valutazione delle quantità re<strong>la</strong>tive degli elementi presenti nel<br />
campione.<br />
Per il riconoscimento delle <strong>di</strong>verse specie atomiche devono essere forniti degli<br />
appositi valori standard re<strong>la</strong>tivi a campioni contenenti quel dato elemento<br />
chimico.Purtuttavia le analisi chimiche SEM/EDS non sono estremamente<br />
accurate dal punto <strong>di</strong> vista quantitativo.<br />
4.4.6 COLTURA CELLULARE<br />
Lo stu<strong>di</strong>o proposto è mirato al<strong>la</strong> ottimizzazione dei parametri del processo <strong>di</strong><br />
semina <strong>di</strong> osteob<strong>la</strong>sti (portata <strong>di</strong> efflusso, numero <strong>di</strong> cicli) in con<strong>di</strong>zioni<br />
<strong>di</strong>namiche al fine <strong>di</strong> definire un protocollo impiegabile <strong>per</strong> altre tipologie <strong>di</strong><br />
costrutti cellu<strong>la</strong>ri del<strong>la</strong> stessa natura. A seguito dell’ottimizzazione del processo <strong>di</strong><br />
semina saranno compiuti ulteriori valutazioni mirate a quantificare l’efficienza dei<br />
meccanismi <strong>di</strong> interazione ed adesione cellu<strong>la</strong>/substrato (es. vitalità cellu<strong>la</strong>re)<br />
all’interno del<strong>la</strong> struttura tri<strong>di</strong>mensionale e definire, quin<strong>di</strong>, delle re<strong>la</strong>zioni tra i<br />
meccanismi <strong>di</strong> formazione e crescita dei tessuti, <strong>la</strong> formazione <strong>di</strong> matrice<br />
extracellu<strong>la</strong>re e <strong>la</strong> <strong>di</strong>stribuzione spaziale all’interno del costrutto al variare del<strong>la</strong><br />
velocità <strong>di</strong> <strong>per</strong>fusione del mezzo <strong>di</strong> coltura nel caso <strong>di</strong> semina statica e <strong>di</strong> semina<br />
<strong>di</strong>namica.