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Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...

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MATERIALI, METODI E STRUMENTAZIONE - 111<br />

In risposta a questo bombardamento si verificano una serie <strong>di</strong> fenomeni tra cui<br />

l’emissione <strong>di</strong> elettroni secondari, con energia <strong>di</strong> pochi eV, e <strong>di</strong> elettroni<br />

retro<strong>di</strong>ffusi, <strong>di</strong> alta energia, generati dall’interazione del fascio incidente con gli<br />

atomi del campione.<br />

Poiché l’intensità dell’emissione <strong>di</strong> elettroni retro<strong>di</strong>ffusi <strong>di</strong>pende, oltre che<br />

dall’angolo con cui il fascio colpisce <strong>la</strong> su<strong>per</strong>ficie del campione, anche dal numero<br />

atomico me<strong>di</strong>o del campione, variazioni locali del numero atomico, dovute al<strong>la</strong><br />

presenza <strong>di</strong> atomi pesanti, producono variazioni nel contrasto dell’immagine.<br />

Oltre a questi fenomeni l’interazione del fascio <strong>di</strong> elettroni incidente con il<br />

campione ha come ulteriore effetto quello <strong>di</strong> produrre raggi X primari, con<br />

lunghezze d’onda ed energie caratteristiche degli elementi presenti nel campione.<br />

Lo strumento SEM/EDAX raccoglie lo spettro del<strong>la</strong> ra<strong>di</strong>azione X emessa dal<br />

cristallo e lo utilizza <strong>per</strong> identificare gli atomi presenti.<br />

Dal<strong>la</strong> lettura dello spettro, poiché l’ampiezza <strong>di</strong> ogni picco è <strong>di</strong>rettamente<br />

proporzionale al<strong>la</strong> quantità <strong>di</strong> fotoni emessa da un partico<strong>la</strong>re elemento, è<br />

possibile fare una valutazione delle quantità re<strong>la</strong>tive degli elementi presenti nel<br />

campione.<br />

Per il riconoscimento delle <strong>di</strong>verse specie atomiche devono essere forniti degli<br />

appositi valori standard re<strong>la</strong>tivi a campioni contenenti quel dato elemento<br />

chimico.Purtuttavia le analisi chimiche SEM/EDS non sono estremamente<br />

accurate dal punto <strong>di</strong> vista quantitativo.<br />

4.4.6 COLTURA CELLULARE<br />

Lo stu<strong>di</strong>o proposto è mirato al<strong>la</strong> ottimizzazione dei parametri del processo <strong>di</strong><br />

semina <strong>di</strong> osteob<strong>la</strong>sti (portata <strong>di</strong> efflusso, numero <strong>di</strong> cicli) in con<strong>di</strong>zioni<br />

<strong>di</strong>namiche al fine <strong>di</strong> definire un protocollo impiegabile <strong>per</strong> altre tipologie <strong>di</strong><br />

costrutti cellu<strong>la</strong>ri del<strong>la</strong> stessa natura. A seguito dell’ottimizzazione del processo <strong>di</strong><br />

semina saranno compiuti ulteriori valutazioni mirate a quantificare l’efficienza dei<br />

meccanismi <strong>di</strong> interazione ed adesione cellu<strong>la</strong>/substrato (es. vitalità cellu<strong>la</strong>re)<br />

all’interno del<strong>la</strong> struttura tri<strong>di</strong>mensionale e definire, quin<strong>di</strong>, delle re<strong>la</strong>zioni tra i<br />

meccanismi <strong>di</strong> formazione e crescita dei tessuti, <strong>la</strong> formazione <strong>di</strong> matrice<br />

extracellu<strong>la</strong>re e <strong>la</strong> <strong>di</strong>stribuzione spaziale all’interno del costrutto al variare del<strong>la</strong><br />

velocità <strong>di</strong> <strong>per</strong>fusione del mezzo <strong>di</strong> coltura nel caso <strong>di</strong> semina statica e <strong>di</strong> semina<br />

<strong>di</strong>namica.

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