Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...
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CONCLUSIONI<br />
CONCLUSIONI - 231<br />
L’attività <strong>di</strong> ricerca sviluppata in questo <strong>la</strong>voro <strong>di</strong> tesi è stato rivolta al<strong>la</strong><br />
definizione ed all’ottimizzazione <strong>di</strong> tecniche innovative <strong>per</strong> <strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> <strong>di</strong><br />
scaffold tri<strong>di</strong>mensionali in grado <strong>di</strong> integrarsi in tempi brevi con l’ambiente<br />
fisiologico in cui vengono inseriti sostituendo sia da un punto <strong>di</strong> vista biologico<br />
che da un punto <strong>di</strong> vista biomeccanico il tessuto osseo naturale.<br />
La prima fase del <strong>la</strong>voro è stata de<strong>di</strong>cata principalmente al<strong>la</strong> progettazione dei<br />
substrati me<strong>di</strong>ante <strong>di</strong>fferenti tecniche e meto<strong>di</strong>che <strong>di</strong> preparazione quali <strong>la</strong> tecnica<br />
del salt leaching in combinazione con un’inversione <strong>di</strong> fase determinata dal<strong>la</strong><br />
presenza <strong>di</strong> un non solvente, <strong>la</strong> separazione <strong>di</strong> fase indotta dal<strong>la</strong> tem<strong>per</strong>atura<br />
(TIPS) e <strong>la</strong> pseudo-sinterizzazione <strong>per</strong> fusione (MIMS) <strong>di</strong> microsfere ottenute <strong>per</strong><br />
emulsione.<br />
Nel caso dei substrati realizzati me<strong>di</strong>ante salt leaching si è proceduto<br />
all’ottimizzazione dei molteplici parametri caratterizzanti i materiali e <strong>la</strong> loro<br />
preparazione. In partico<strong>la</strong>re, con l’ausilio <strong>di</strong> strumentazioni <strong>per</strong> l’indagine<br />
morfologica (microscopio a scansione elettronica, porosimetro ad intrusione <strong>di</strong> mercurio, etc),<br />
sono stati valutati gli effetti indotti dai parametri legati al<strong>la</strong> preparazione del<br />
sistema (PCL/DMAC/NaCl) come l’ammontare re<strong>la</strong>tivo delle singole fasi<br />
costituenti il sistema (polimero/solvente/agente porogeno), <strong>la</strong> <strong>di</strong>mensione dei<br />
cristalli <strong>di</strong> NaCl impiegati (150-212, 212-300, 300-500), dal peso moleco<strong>la</strong>re del<br />
polimero (10 o 65 kDa) nonchè dai parametri associati al processo <strong>di</strong><br />
<strong>realizzazione</strong> (tem<strong>per</strong>atura, precompressione, aggiunta <strong>di</strong> sale sul fondo) sul<strong>la</strong><br />
morfologia del substrato.<br />
Le strutture ottenute hanno mostrano un elevato grado <strong>di</strong> porosità (su<strong>per</strong>iore al<br />
90%), alta interconnessione dei pori con una <strong>di</strong>mensione me<strong>di</strong>a <strong>di</strong> circa 200-<br />
300µm ottimale <strong>per</strong> <strong>la</strong> semina e <strong>la</strong> coltura in vitro <strong>di</strong> osteob<strong>la</strong>sti [ 6 ][ 59 ].<br />
Inoltre, l’elevato rapporto su<strong>per</strong>ficie/volume dei pori consente <strong>di</strong> accomodare un<br />
enorme numero <strong>di</strong> cellule in<strong>di</strong>spensabile <strong>per</strong> il ripristino funzionale dei tessuti<br />
influenzando favorevolmente <strong>la</strong> migrazione cellu<strong>la</strong>re ed il signaling intracellu<strong>la</strong>re.<br />
L’utilizzo combinato <strong>di</strong> un terzo componente, non solvente <strong>per</strong> il polimero, ha<br />
consentito <strong>la</strong> formazione, <strong>per</strong> inversione <strong>di</strong> fase, <strong>di</strong> una ulteriore porosità<br />
all’interno del<strong>la</strong> struttura, delle <strong>di</strong>mensioni <strong>di</strong> circa 1-10 µm in grado <strong>di</strong> garantire<br />
un efficace trasporto dei metaboliti necessari al sostentamento cellu<strong>la</strong>re nonchè il<br />
ri<strong>la</strong>scio control<strong>la</strong>to <strong>di</strong> molecole <strong>di</strong> piccole <strong>di</strong>mensioni (fattori <strong>di</strong> crescita,<br />
antibiotici, etc.).