Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...

216 - CAPITOLO 6
trazione dello scaffold (i valori del modulo elastico EC ed ET sono stati calcolati
solo nel caso di scaffold in PCL realizzato mediante PI/SL privo di sistemi di
rinforzo).
Riassumendo, dallo studio morfofunzionale è emerso che ad una elevata
potenzialità dei substrati realizzati per phase inversion/salt leaching dal punto di
vista morfologico corrisponde una risposta meccanica ancora insufficiente per
l’applicazione nell’ingegneria del tessuto osseo. D’altra parte, non va dimenticato
che il modulo elastico, considerato per analizzare il comportamento meccanico
dello scaffold, descrive solo parzialmente la risposta meccanica dello scaffold in
quanto non tiene conto del contributo, assolutamente non trascurabile, offerto
dalla pressione idrostatica esercitata dai fluidi biologici che l’attraversano.
In altri termini, appare riduttivo lo studio dei costrutti senza considerare l’azione
dei fluidi biologici in quanto è dimostrato che le condizioni fluidodinamiche
imposte sono in grado di influenzare sia i principali meccanismi cellulari che la
risposta alle sollecitazioni meccaniche.
In questa direzione, è stato approntato in collaborazione con i biologi un
protocollo di semina e di coltura in vitro di osteoblasti avvalendosi di un
dispositivo appositamente realizzato in grado di riprodurre le condizioni
fluidodinamiche desiderate del mezzo di coltura (semina dinamica).
La curva di taratura per la semina cellulare, costruita mediante analisi allo
spettrofluorimetro, ha consentito di identificare il numero ottimale di cellule (2.5
10 5 cellule) per una semina efficiente mentre test di vitalità cellulare (Alamar Blue)
hanno permesso di stimare la maggiore efficienza della semina dinamica rispetto
alla semina statica con il 67% di cellule vive dopo 24 h dalla semina
Lo stato vitale delle cellule è stato confermato dall’analisi istologica che ha
evidenziato una corretta forma cellulare ed una distribuzione omogenea
all’interno degli spazi a loro disposizione soprattutto nel caso di semina dinamica
e dall’osservazione al microscopio confocale ha consentito di verificare la
migliore penetrazione cellulare nel caso di semina dinamica con una prevalenza di
cellule vive sulla superficie anche dopo 7 giorni di coltura statica.