Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...
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86 - CAPITOLO 4<br />
4.2.4 MICROSFERE E SCAFFOLD SINTERIZZATI<br />
In questo <strong>la</strong>voro, prima <strong>di</strong> procedere al<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> degli scaffold sinterizzati,<br />
si è proceduto al<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> ed all’ottimizzazione <strong>di</strong> microsfere <strong>di</strong><br />
policapro<strong>la</strong>ttone (PCL) (Aldrich Chemical Company 181609-500G, Mw: 65000). Per<br />
<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> <strong>di</strong> tali particelle sono state utilizzate due metodologie: singo<strong>la</strong><br />
emulsione (O/W) e doppia emulsione (W/O/W).<br />
Singo<strong>la</strong> emulsione<br />
Uno dei meto<strong>di</strong> più comuni <strong>per</strong> <strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> <strong>di</strong> microsfere polimeriche<br />
consiste nell’emulsione oil-in-water (O/W) in cui una soluzione polimerica<br />
organica viene <strong>di</strong>s<strong>per</strong>sa in una fase acquosa continua. Nel caso specifico <strong>la</strong> fase<br />
<strong>di</strong>s<strong>per</strong>sa è costituita da una soluzione <strong>di</strong> Policapro<strong>la</strong>ttone e <strong>di</strong>clorometano<br />
(Aldrich Chemical Company, 99,9%) il quale risulta un ottimo solvente <strong>per</strong> il<br />
polimero scelto anche a tem<strong>per</strong>atura ambiente.<br />
La fase <strong>di</strong>s<strong>per</strong>dente, invece, consiste in una soluzione <strong>di</strong> 500 ml <strong>di</strong> acqua<br />
bi<strong>di</strong>stil<strong>la</strong>ta con una concentrazione dello 0,25% <strong>di</strong> polivini<strong>la</strong>lcool (PVA) (Aldrich<br />
Chemical Company, 87-89% idrolizzato, Mw: 13000÷23000). La presenza <strong>di</strong> un agente<br />
emulsionante nel<strong>la</strong> fase acquosa è fondamentale <strong>per</strong> ridurre i fenomeni <strong>di</strong><br />
coalescenza e <strong>di</strong> aggregazione delle microsfere, in quanto ha il compito <strong>di</strong><br />
prevenirne <strong>la</strong> coagu<strong>la</strong>zione durante l’evaporazione del solvente.<br />
La procedura <strong>di</strong> <strong>realizzazione</strong> è <strong>la</strong> seguente:<br />
1. Preparazione del<strong>la</strong> soluzione acquosa <strong>di</strong> PVA in agitazione magnetica al<strong>la</strong><br />
tem<strong>per</strong>atura <strong>di</strong> circa 100°C <strong>per</strong> circa un’ora in modo da consentire <strong>la</strong><br />
completa <strong>di</strong>ssoluzione del polimero.<br />
2. Preparazione del<strong>la</strong> fase <strong>di</strong>s<strong>per</strong>dente ottenuta <strong>di</strong>ssolvendo il<br />
policapro<strong>la</strong>ttone in <strong>di</strong>clorometano (20 ml) <strong>per</strong> agitazione magnetica a<br />
tem<strong>per</strong>atura ambiente fino a formare un sistema omogeneo.<br />
3. Le due soluzioni ottenute vengono misce<strong>la</strong>te <strong>per</strong> circa tre ore ad<br />
un’opportuna velocità, me<strong>di</strong>ante un agitatore meccanico (FALC<br />
Instruments mod. AT, PW: 85 W), al fine <strong>di</strong> ottenere delle microparticelle<br />
<strong>di</strong>s<strong>per</strong>se (Fig. 42).<br />
4. Il sistema bifasico ottenuto viene <strong>la</strong>sciato in agitazione magnetica <strong>per</strong> circa<br />
do<strong>di</strong>ci ore sotto cappa chimica, in modo da consentire <strong>la</strong> completa<br />
evaporazione del solvente organico, altamente vo<strong>la</strong>tile, i cui residui<br />
risulterebbero nocivi <strong>per</strong> l’applicazione in vivo.<br />
5. Successivamente le microsfere solide vengono separate <strong>per</strong> filtraggio e<br />
sottoposte a tre successivi <strong>la</strong>vaggi in acqua bi<strong>di</strong>stil<strong>la</strong>ta <strong>per</strong> favorire<br />
l’eliminazione dell’agente emulsionante.