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Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...

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86 - CAPITOLO 4<br />

4.2.4 MICROSFERE E SCAFFOLD SINTERIZZATI<br />

In questo <strong>la</strong>voro, prima <strong>di</strong> procedere al<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> degli scaffold sinterizzati,<br />

si è proceduto al<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> ed all’ottimizzazione <strong>di</strong> microsfere <strong>di</strong><br />

policapro<strong>la</strong>ttone (PCL) (Aldrich Chemical Company 181609-500G, Mw: 65000). Per<br />

<strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> <strong>di</strong> tali particelle sono state utilizzate due metodologie: singo<strong>la</strong><br />

emulsione (O/W) e doppia emulsione (W/O/W).<br />

Singo<strong>la</strong> emulsione<br />

Uno dei meto<strong>di</strong> più comuni <strong>per</strong> <strong>la</strong> <strong>realizzazione</strong> <strong>di</strong> microsfere polimeriche<br />

consiste nell’emulsione oil-in-water (O/W) in cui una soluzione polimerica<br />

organica viene <strong>di</strong>s<strong>per</strong>sa in una fase acquosa continua. Nel caso specifico <strong>la</strong> fase<br />

<strong>di</strong>s<strong>per</strong>sa è costituita da una soluzione <strong>di</strong> Policapro<strong>la</strong>ttone e <strong>di</strong>clorometano<br />

(Aldrich Chemical Company, 99,9%) il quale risulta un ottimo solvente <strong>per</strong> il<br />

polimero scelto anche a tem<strong>per</strong>atura ambiente.<br />

La fase <strong>di</strong>s<strong>per</strong>dente, invece, consiste in una soluzione <strong>di</strong> 500 ml <strong>di</strong> acqua<br />

bi<strong>di</strong>stil<strong>la</strong>ta con una concentrazione dello 0,25% <strong>di</strong> polivini<strong>la</strong>lcool (PVA) (Aldrich<br />

Chemical Company, 87-89% idrolizzato, Mw: 13000÷23000). La presenza <strong>di</strong> un agente<br />

emulsionante nel<strong>la</strong> fase acquosa è fondamentale <strong>per</strong> ridurre i fenomeni <strong>di</strong><br />

coalescenza e <strong>di</strong> aggregazione delle microsfere, in quanto ha il compito <strong>di</strong><br />

prevenirne <strong>la</strong> coagu<strong>la</strong>zione durante l’evaporazione del solvente.<br />

La procedura <strong>di</strong> <strong>realizzazione</strong> è <strong>la</strong> seguente:<br />

1. Preparazione del<strong>la</strong> soluzione acquosa <strong>di</strong> PVA in agitazione magnetica al<strong>la</strong><br />

tem<strong>per</strong>atura <strong>di</strong> circa 100°C <strong>per</strong> circa un’ora in modo da consentire <strong>la</strong><br />

completa <strong>di</strong>ssoluzione del polimero.<br />

2. Preparazione del<strong>la</strong> fase <strong>di</strong>s<strong>per</strong>dente ottenuta <strong>di</strong>ssolvendo il<br />

policapro<strong>la</strong>ttone in <strong>di</strong>clorometano (20 ml) <strong>per</strong> agitazione magnetica a<br />

tem<strong>per</strong>atura ambiente fino a formare un sistema omogeneo.<br />

3. Le due soluzioni ottenute vengono misce<strong>la</strong>te <strong>per</strong> circa tre ore ad<br />

un’opportuna velocità, me<strong>di</strong>ante un agitatore meccanico (FALC<br />

Instruments mod. AT, PW: 85 W), al fine <strong>di</strong> ottenere delle microparticelle<br />

<strong>di</strong>s<strong>per</strong>se (Fig. 42).<br />

4. Il sistema bifasico ottenuto viene <strong>la</strong>sciato in agitazione magnetica <strong>per</strong> circa<br />

do<strong>di</strong>ci ore sotto cappa chimica, in modo da consentire <strong>la</strong> completa<br />

evaporazione del solvente organico, altamente vo<strong>la</strong>tile, i cui residui<br />

risulterebbero nocivi <strong>per</strong> l’applicazione in vivo.<br />

5. Successivamente le microsfere solide vengono separate <strong>per</strong> filtraggio e<br />

sottoposte a tre successivi <strong>la</strong>vaggi in acqua bi<strong>di</strong>stil<strong>la</strong>ta <strong>per</strong> favorire<br />

l’eliminazione dell’agente emulsionante.

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