Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...

126 - CAPITOLO 5
b) Analisi di immagini 2D
Partendo dalle immagini al microscopio a scansione elettronica è stata ottenuta
una stima delle principali caratteristiche morfologiche dello scaffold (raggio
medio dei pori, distribuzione spaziale, grado di porosità totale, percentuale
relativa di L-macroporosità ed S-macroporosità e grado di interconnessione dei
pori) mediante l’utilizzo di un software dedicato all’elaborazione delle immagini
(ImageJ).
L’elaborazione condotta risulta ovviamente diversa a seconda degli aspetti
morfologici da indagare.
In particolare, la valutazione del raggio medio e della distribuzione dei pori
(L-macroporosità), è stata realizzata modificando opportunamente il contrasto
dell’immagine (enhance contrast/ threshold) e modulando lo sfocamento attraverso la
funzione di smoothing.
Successivamente è stata effettuata una ridefinizione dei contorni più probabili dei
pori, quindi l’analisi delle dimensioni dei pori (particles analysis) che ha consentito
l’estrapolazione di tutti i pori la cui superficie risulta costituita da un numero di
pixel contenuti in un opportuno intervallo (pari al numero di pixel
rappresentativo di superfici circolari di raggio compreso tra 25 e 130 µm).
I dati finali ottenuti da tale analisi, forniscono il numero dei pori contati, la
somma totale delle loro aree, la percentuale di porosità calcolata rispetto all’area
dell’immagine, la superficie media dei pori (e quindi il raggio medio dei pori) e la
loro distribuzione dimensionale.
Nel seguito (Fig.61) si riportano le immagini ottenute, step by step, mediante
l’elaborazione di immagini ottenute al microscopio elettronico;
In particolare, nella prima colonna si riportano le immagini ricavate a seguito
dell’applicazione di tutte le funzioni necessarie a modulare il contrasto e lo
sfocamento dell’immagine nonché a ripulire l’immagine dal rumore presente.
La seconda colonna, invece, evidenzia i pori individuati, enumerati ed
approssimati alle loro superfici equivalenti mediante l’analisi delle particelle.
Successivamente (Fig.62, Tab.30-31) sono riportati i risultati ottenuti relativi al
grado di porosità complessivo, alle frazioni volumetriche relative di L-macropori
ed S-macropori nonché alle distribuzioni dei raggi di L-macropori per le diverse
tipologie di campioni analizzate (fig.63).