Materiali e Tecnologie per la realizzazione di sostituti - FedOA ...

116 - CAPITOLO 4
1. La luce, emessa dal laser, è deviata dallo specchio dicroico
2. Dopo, la luce investe il campione, eccitandolo. I suoi fluorocromi emettono
una radiazione luminosa la quale, catturata dalle lenti dell’obiettivo, colpisce lo
specchio dicroico. Attraverso questo la luce riflessa è deviata mentre la luce
fluorescente passa attraverso il pinhole e un filtro, giungendo al
fotomoltiplicatore.
3. Il pinhole funge da diaframma e impedisce che la luce proveniente dalle zone
fuori fuoco raggiunga il fotomoltiplicatore. In questo modo solo il segnale
luminoso relativo al piano focale contribuisce alla formazione dell’immagine
finale.
4. Il fotomoltiplicatore trasforma l’intensità luminosa rilevata in un segnale
elettrico proporzionale all’intensità stessa.
5. Il segnale elettrico uscente dal fotomoltiplicatore è poi elaborato via software,
ed è registrata l’intensità luminosa in ogni punto. Tali valori di intensità sono
utilizzati per ricostruire l’immagine video: ogni punto del campione
corrisponde ad un pixel, e l’intensità luminosa di ogni punto è rappresentata
da un tono di grigio.
Variando la messa a fuoco è possibile effettuare scansioni a piani focali variabili.
Queste sono dette sezioni ottiche e la loro unione, consente di ricostruire
un'immagine complessiva dell'intero volume.
Figura 53: Sezioni ottiche e ricostruzione 3D di un’immagine al confocale [ 144 ]