Broschüre 2004 zum Download (pdf | 1994,28 KB) - H. Wilhelm ...

Abbildung 10 Abbildung 11
ben. Wir interessieren uns zum Beispiel für einen Industriestamm
und einen E-coli-Wildtyp, der sich auch
von denen unterscheidet. Aber der wesentliche Unterschied
ist, dass wir bei ganz anderen Zelldichten arbeiten.
Also bei uns spielen erst Zelldichten über 60 g/
Liter eine Rolle, und hier sind es 0,2 g/Liter.
Dann arbeiten die Versuchsansteller in der Regel
im Schüttelkolben, und ich werde Ihnen gleich zeigen,
das ist auch ein Riesenunterschied. Und, was noch
stärker einschlägt, ist, dass die Mediziner oder Mikrobiologen,
woher die Arbeiten stammen, in der Regel
mit Komplex-Medium arbeiten. In der Industrie werden
ausschließlich Minimalmedien genommen, also
Medien, die rein nur aus Salzen bestehen und einer
ganz genau definierten Kohlenstoffquelle.
Ich zeige Ihnen gleich, wo da die Unterschiede
liegen. Essigsäure hemmt natürlich auch, und Essigsäure
wird in der Endphase, wenn das Wachstum
der Mikroorganismen aufhört, auch gebildet. Deshalb
hat man am Anfang gedacht, Essigsäure spielt
eine ganz wesentliche Rolle. Im Schüttelkolben wird
schon bei kleinen Essigsäurekonzentrationen sehr
stark gehemmt, aber im Fermenter ist das wesentlich
abgemildert. Die Konzentrationen, die da tatsächlich
auftreten, sind so in Größenordnungen um 5 bis 6 g/
Liter, und man sieht, ein bisschen hemmt das schon,
aber das ist nicht der Punkt, warum das abgeschaltet
wird (Abbildung 11). Wir wissen nicht, warum das so
unterschiedlich ist, und das ist auch eine Frage, die
wir noch weiter verfolgen wollen.
3. Flowcytometrie
Eine Möglichkeit, sich anzuschauen, was das ist,
ist Flowcytometrie. Hier haben wir das bei einer
normalen Batch-Fermentation. Das ist auch ein
Industriestamm, der macht ein Protein und wächst
auch ohne Membran auf etwa 40 g/Liter. Wir haben
in den verschiedenen Phasen Proben genommen und
im Flowcytometer angesehen. Man sieht, mit zuneh-
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